Polizaharida din Chlorella (PFC), ca polizaharidă naturală, a atras multă atenție din partea cercetătorilor în ultimii ani datorită avantajelor sale de toxicitate redusă, efecte secundare reduse și efecte cu spectru larg. Funcțiile sale de scădere a lipidelor din sânge, antitumorale, antiinflamatorii, anti-Parkinson, anti-îmbătrânire etc. au fost validate preliminar prin experimente in vitro și in vivo. Cu toate acestea, există încă o lacună în cercetarea privind PFC ca modulator imun uman.

Celulele dendritice (DC) sunt cele mai puternice celule specializate prezentatoare de antigen din corpul uman. Numărul de DC din corpul uman este extrem de mic, iar modelul de inducție in vitro mediat de citokine, și anume DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman (moDC), este utilizat în mod obișnuit. Modelul DC indus in vitro a fost raportat pentru prima dată în 1992, fiind sistemul tradițional de cultură pentru DC. În general, necesită cultivare timp de 6-7 zile. Celulele din măduva osoasă de șoarece pot fi cultivate cu factor de stimulare a coloniilor de granulocite și macrofage (GM-CSF) și interleukină (IL) -4 pentru a obține DC imature (grupul PBS). Citokinele sunt adăugate ca stimuli maturi și cultivate timp de 1-2 zile pentru a obține DC mature. Un alt studiu a raportat că celulele CD14+ umane purificate au fost cultivate cu interferon – β (IFN – β) sau IL-4 timp de 5 zile, apoi cultivate cu factor de necroză tumorală-a (TNF-a) timp de 2 zile pentru a obține celule dendritice (DC) cu expresie ridicată a CD11c și CD83, care au o capacitate mai puternică de a promova proliferarea celulelor T CD4+ alogene și a celulelor T CD8+. Numeroase polizaharide din surse naturale au o activitate imunomodulatoare excelentă, cum ar fi polizaharidele din ciuperci shiitake, ciuperci cu gill split, ciuperci Yunzhi și Poria cocos, care au fost aplicate în practica clinică. Acestea pot îmbunătăți eficient funcția imunitară a organismului, pot spori imunitatea și pot servi ca terapii adjuvante pentru tratamentul antitumoral. Cu toate acestea, există puține rapoarte de cercetare despre PFC ca modulator imun uman. Prin urmare, acest articol efectuează cercetări preliminare privind rolul și mecanismele conexe ale PFC în promovarea maturării moDC-urilor, pentru a evalua potențialul PFC ca modulator imun natural.

Datorită proporției extrem de scăzute de DC în țesuturile umane și a conservării interspecii ridicate între DC-urile de șoarece și DC-urile umane, pentru a rezolva dificultățile de cercetare cauzate de producția scăzută de DC, au fost studiate modele de inducție in vitro a DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman, care pot obține DC cu imunogenitate bună într-o perioadă scurtă de timp. Prin urmare, acest studiu a utilizat metoda tradițională de inducere a DC-urilor umane in vitro: co-cultivarea in vitro a rhGM CSF și rhIL-4, schimbarea mediului o dată la două zile și obținerea de DC-uri imature în a 5-a zi; În a 6-a zi, s-au adăugat volume egale de PBS, PFC și LPS conform grupării și s-au cultivat timp de 24 de ore ca protocol de cultură pentru inducerea DC derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman.

Polizaharidele derivate din produse naturale prezintă avantajele toxicității reduse și ale costului redus ca imunostimulanți. După experimente preliminare, grupul nostru de cercetare a constatat că PFC amplifică semnificativ markerul matur CD83 pe suprafața celulelor dendrite (DC) derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman, induse in vitro. Rezultatele citometriei în flux au arătat că intervenția PFC la o concentrație de 10 μg/mL timp de 24 de ore a dus la o expresie maximă a markerului matur CD83 pe suprafața DC-urilor, indicând faptul că DC-urile au intrat într-o stare matură. Prin urmare, grupul nostru de cercetare a determinat planul de inducție și intervenție in vitro. CD83 este un biomarker matur important pe suprafața DC-urilor, în timp ce CD86 servește ca o moleculă co-stimulatoare importantă pe suprafața DC-urilor, acționând ca al doilea semnal pentru activarea celulelor T. Expresia sporită a doi biomarkeri CD83 și CD86 indică faptul că PFC promovează maturarea DC-urilor derivate din celule mononucleare din sângele periferic uman, sugerând că PFC poate crește simultan nivelul de secreție de citokine pe suprafața DC-urilor. Prin urmare, acest studiu a evaluat nivelurile de citokine IL-6, TNF-a și IL-10 secretate de celulele dendritice (DC) utilizând testul ELISA. IL-10 este strâns legat de toleranța imună a DC, iar DC cu toleranță imună sunt utilizate în mod obișnuit în tratamentul tumorilor, oferind potențiale idei terapeutice pentru toleranța imună în transplantul de organe; Familia 1L-6 joacă un rol important în imunitatea înnăscută și adaptivă, hematopoieză și efecte antiinflamatorii; Există studii care indică faptul că IL-6 și TGF β participă împreună la diferențierea celulelor Th17; Când organismul este invadat de un virus, TNF-a produs de DC ca răspuns la activarea virusului acționează ca un factor de maturare autocrină pentru a promova maturarea DC. Blocarea TNF-a va plasa DC într-un stadiu imatur, împiedicându-le să își exercite pe deplin funcția de prezentare a antigenului. Datele ELISA din acest studiu au arătat că nivelul de secreție de IL-10 în grupul cu celule precursoare ale celulelor (PFC) a fost semnificativ crescut în comparație cu celelalte două grupuri, indicând faptul că PFC sporește toleranța imună a DC; Nivelurile crescânde de secreție de IL-6 și TNF-a sugerează că PFC ar putea avea efectul de a spori celulele dendritice (DC) pentru a promova diferențierea celulelor T.