Hlorellas polisaharīds (PFC) kā dabisks polisaharīds pēdējos gados ir piesaistījis lielu zinātnieku uzmanību, pateicoties tā zemajai toksicitātei, nelielajam blakusparādību skaitam un plaša spektra iedarbībai. Tā funkcijas asins lipīdu līmeņa pazemināšanā, pretvēža, pretiekaisuma, pretparkinsonisma, novecošanās aizkavēšanā u.c. ir provizoriski apstiprinātas in vitro un in vivo eksperimentos. Tomēr pētījumos par PFC kā cilvēka imūnmodulatoru joprojām ir nepilnības.

Dendritiskās šūnas (DC) ir visspēcīgākās specializētās antigēnus prezentējošās šūnas cilvēka organismā. DC skaits cilvēka organismā ir ārkārtīgi mazs, un parasti tiek izmantots citokīnu mediēts in vitro indukcijas modelis, proti, no cilvēka perifēro asiņu mononukleārajām šūnām iegūtas DC (moDC). In vitro inducēto DC modelis pirmo reizi tika aprakstīts 1992. gadā, un tā ir tradicionālā DC kultivēšanas sistēma. Parasti tas ir jākultivē 6–7 dienas. Peles kaulu smadzeņu šūnas var kultivēt ar granulocītu makrofāgu koloniju stimulējošo faktoru (GM-CSF) un interleikīnu (IL) -4, lai iegūtu nenobriedušus DC (PBS grupa). Citokīnus pievieno kā nobriedušus stimulus un kultivē 1–2 dienas, lai iegūtu nobriedušus DC. Citā pētījumā ziņots, ka attīrītas cilvēka CD14+ šūnas 5 dienas tika kultivētas ar interferonu β (IFN-β) vai IL-4 un pēc tam 2 dienas kultivētas ar audzēja nekrozes faktoru α (TNF-α), lai iegūtu DC ar augstu CD11c un CD83 ekspresiju, kam ir spēcīgāka spēja veicināt allogēnu CD4+T šūnu un CD8+T šūnu proliferāciju. Daudziem polisaharīdiem no dabīgiem avotiem piemīt lieliska imūnmodulējoša aktivitāte, piemēram, polisaharīdiem no šitaki sēnēm, šķeltajām žaunu sēnēm, Junži sēnēm un Poria kokosriekstu sēnēm, kas ir pielietoti klīniskajā praksē. Tie var efektīvi uzlabot organisma imūnfunkciju, pastiprināt imunitāti un kalpot kā adjuvanta terapija pretvēža ārstēšanā. Tomēr ir maz pētījumu ziņojumu par PFGC kā cilvēka imūnmodulatoru. Tāpēc šajā rakstā tiek veikti sākotnējie pētījumi par PFGC lomu un saistītajiem mehānismiem moDC nobriešanas veicināšanā, lai novērtētu PFGC potenciālu kā dabisku imūnmodulatoru.

Sakarā ar ārkārtīgi zemo DC īpatsvaru cilvēka audos un augsto starpsugu konservāciju starp peļu DC un cilvēka DC, lai atrisinātu pētniecības grūtības, ko rada zemā DC produkcija, ir pētīti no cilvēka perifēro asiņu mononukleārajām šūnām iegūtu DC in vitro indukcijas modeļi, kas īsā laika periodā var iegūt DC ar labu imunogenitāti. Tāpēc šajā pētījumā tika izmantota tradicionālā cilvēka DC inducēšanas metode in vitro: rhGM CSF un rhIL-4 kopīga kultivēšana in vitro, barotnes maiņa katru otro dienu un nenobriedušu DC iegūšana 5. dienā; 6. dienā atbilstoši grupēšanai tika pievienoti vienādi PBS, PFC un LPS tilpumi un kultivēti 24 stundas kā kultivēšanas protokols no cilvēka perifēro asiņu mononukleārajām šūnām iegūtu DC inducēšanai.

No dabīgiem produktiem iegūtiem polisaharīdiem kā imūnstimulējošiem līdzekļiem piemīt zema toksicitāte un zemas izmaksas. Pēc sākotnējiem eksperimentiem mūsu pētnieku grupa atklāja, ka PFĶ ievērojami pastiprina nobriedušā marķiera CD83 ekspresiju uz cilvēka perifēro asiņu mononukleāro šūnu atvasinātu DC šūnu virsmas, kas inducētas in vitro. Plūsmas citometrijas rezultāti parādīja, ka PFĶ intervence 10 μg/ml koncentrācijā 24 stundas izraisīja nobriedušā marķiera CD83 ekspresijas maksimumu uz DC virsmas, norādot, ka DC ir nonākušas nobriedušā stāvoklī. Tāpēc mūsu pētnieku grupa noteica in vitro indukcijas un intervences plānu. CD83 ir svarīgs nobriedis biomarķieris uz DC virsmas, savukārt CD86 kalpo kā svarīga kostimulējoša molekula uz DC virsmas, darbojoties kā otrais signāls T šūnu aktivizēšanai. Divu biomarķieru CD83 un CD86 pastiprinātā ekspresija norāda, ka PFĶ veicina cilvēka perifēro asiņu mononukleāro šūnu atvasinātu DC nobriešanu, kas liecina, ka PFĶ var vienlaikus palielināt citokīnu sekrēcijas līmeni uz DC virsmas. Tāpēc šajā pētījumā, izmantojot ELISA, tika novērtēts DC sekretēto citokīnu IL-6, TNF-α un IL-10 līmenis. IL-10 ir cieši saistīts ar DC imūno toleranci, un DC ar imūno toleranci parasti tiek izmantoti audzēju ārstēšanā, sniedzot potenciālas terapeitiskas idejas imūnās tolerances uzlabošanai orgānu transplantācijas laikā; 1L-6 saimei ir svarīga loma iedzimtajā un adaptīvajā imunitātē, hematopoēzē un pretiekaisuma iedarbībā; Ir pētījumi, kas liecina, ka IL-6 un TGF β kopīgi piedalās Th17 šūnu diferenciācijā; Kad organismu iebrūk vīruss, DC saražotais TNF-α, reaģējot uz vīrusa aktivāciju, darbojas kā autokrīnais nobriešanas faktors, lai veicinātu DC nobriešanu. TNF-α bloķēšana novedīs DC nenobriedušā stadijā, neļaujot tiem pilnībā īstenot savu antigēna prezentācijas funkciju. ELISA dati šajā pētījumā parādīja, ka IL-10 sekrēcijas līmenis PFV grupā bija ievērojami paaugstināts, salīdzinot ar pārējām divām grupām, norādot, ka PFV uzlabo DC imūno toleranci; Pieaugošais IL-6 un TNF-α sekrēcijas līmenis liecina, ka PFC var veicināt DC, lai veicinātu T šūnu diferenciāciju.