El polisacárido de Chlorella (PFC), un polisacárido natural, ha captado la atención de los investigadores en los últimos años debido a sus ventajas: baja toxicidad, escasos efectos secundarios y amplio espectro de acción. Sus funciones para reducir los lípidos sanguíneos, así como sus propiedades antitumorales, antiinflamatorias, contra el Parkinson y antienvejecimiento, entre otras, han sido validadas preliminarmente mediante experimentos in vitro e in vivo. Sin embargo, aún existe una brecha en la investigación sobre el PFC como inmunomodulador humano.

Las células dendríticas (CD) son las células presentadoras de antígenos especializadas más potentes del cuerpo humano. El número de CD en el cuerpo humano es extremadamente pequeño, y se suele utilizar un modelo de inducción in vitro mediado por citocinas, concretamente las CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana (CDmo). El modelo de CD inducidas in vitro se describió por primera vez en 1992 y es el sistema de cultivo tradicional para las CD. Generalmente, requiere un cultivo de 6 a 7 días. Las células de médula ósea de ratón se pueden cultivar con factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF) e interleucina (IL)-4 para obtener CD inmaduras (grupo PBS). Se añaden citocinas como estímulos de maduración y se cultivan durante 1 o 2 días para obtener CD maduras. Otro estudio informó que las células CD14+ humanas purificadas se cultivaron con interferón-β (IFN-β) o IL-4 durante 5 días, y luego se cultivaron con factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) durante 2 días para obtener DC con alta expresión de CD11c y CD83, que tienen mayor capacidad para promover la proliferación de células T CD4+ y CD8+ alogénicas. Numerosos polisacáridos de fuentes naturales tienen una excelente actividad inmunomoduladora, como los polisacáridos de los hongos shiitake, los hongos de láminas partidas, los hongos Yunzhi y Poria cocos, que se han aplicado en la práctica clínica. Pueden mejorar eficazmente la función inmunitaria del cuerpo, potenciar la inmunidad y servir como terapias adyuvantes para el tratamiento antitumoral. Sin embargo, hay pocos informes de investigación sobre PFC como inmunomodulador humano. Por lo tanto, este artículo realiza una investigación preliminar sobre el papel y los mecanismos relacionados del PFC en la promoción de la maduración de las moDC, con el fin de evaluar el potencial del PFC como modulador inmunitario natural.

Debido a la proporción extremadamente baja de células dendríticas (CD) en los tejidos humanos y la alta conservación entre especies de CD de ratón y CD humanas, para resolver las dificultades de investigación causadas por la baja producción de CD, se han estudiado modelos de inducción in vitro de CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana, que pueden obtener CD con buena inmunogenicidad en un corto período de tiempo. Por lo tanto, este estudio utilizó el método tradicional de inducción de CD humanas in vitro: cocultivo in vitro de rhGM CSF y rhIL-4, cambiando el medio cada dos días, y obteniendo CD inmaduras el quinto día; el sexto día, se agregaron volúmenes iguales de PBS, PFC y LPS según el grupo y se cultivaron durante 24 horas como protocolo de cultivo para inducir CD derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana.

Los polisacáridos derivados de productos naturales tienen las ventajas de baja toxicidad y bajo costo como inmunoestimulantes. Después de experimentos preliminares, nuestro grupo de investigación encontró que el PFC aumenta significativamente el marcador maduro CD83 en la superficie de células DC derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana inducidas in vitro. Los resultados de citometría de flujo mostraron que la intervención con PFC a una concentración de 10 μg/mL durante 24 horas resultó en una expresión máxima del marcador maduro CD83 en la superficie de las DC, lo que indica que las DC entraron en un estado maduro. Por lo tanto, nuestro grupo de investigación determinó el plan de inducción e intervención in vitro. CD83 es ​​un biomarcador maduro importante en la superficie de las DC, mientras que CD86 actúa como una molécula coestimuladora importante en la superficie de las DC, actuando como una segunda señal para la activación de las células T. La expresión mejorada de dos biomarcadores CD83 y CD86 indica que PFC promueve la maduración de las DC derivadas de células mononucleares de sangre periférica humana, lo que sugiere que PFC puede aumentar simultáneamente el nivel de secreción de citocinas en la superficie de las DC. Por lo tanto, este estudio evaluó los niveles de las citocinas IL-6, TNF-α e IL-10 secretadas por las DC usando ELISA. IL-10 está estrechamente relacionada con la tolerancia inmunológica de las DC, y las DC con tolerancia inmunológica se usan comúnmente en el tratamiento de tumores, proporcionando ideas terapéuticas potenciales para la tolerancia inmunológica en el trasplante de órganos; la familia IL-6 juega un papel importante en la inmunidad innata y adaptativa, hematopoyesis y efectos antiinflamatorios; hay estudios que indican que IL-6 y TGFβ participan conjuntamente en la diferenciación de células Th17; cuando el cuerpo es invadido por un virus, el TNF-α producido por las DC en respuesta a la activación viral actúa como un factor de maduración autocrino para promover la maduración de las DC. El bloqueo del TNF-α inducirá una fase inmadura de las células dendríticas (CD), impidiendo que ejerzan plenamente su función de presentación de antígenos. Los datos de ELISA de este estudio mostraron que el nivel de secreción de IL-10 en el grupo tratado con PFC aumentó significativamente en comparación con los otros dos grupos, lo que indica que el PFC mejora la tolerancia inmunitaria de las CD. El aumento en los niveles de secreción de IL-6 y TNF-α sugiere que el PFC podría potenciar la diferenciación de las células T en las CD.