ഒരു സ്വാഭാവിക പോളിസാക്കറൈഡ് എന്ന നിലയിൽ ക്ലോറെല്ലയിൽ നിന്നുള്ള പോളിസാക്കറൈഡ് (PFC), സമീപ വർഷങ്ങളിൽ പണ്ഡിതരുടെ ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു, കാരണം അതിന്റെ കുറഞ്ഞ വിഷാംശം, കുറഞ്ഞ പാർശ്വഫലങ്ങൾ, വിശാലമായ സ്പെക്ട്രം ഫലങ്ങൾ എന്നിവയാണ് ഗുണങ്ങൾ. രക്തത്തിലെ ലിപിഡുകൾ കുറയ്ക്കുന്നതിലും, ട്യൂമർ വിരുദ്ധമാക്കുന്നതിലും, വീക്കം തടയുന്നതിലും, പാർക്കിൻസൺസ് വിരുദ്ധമാക്കുന്നതിലും, പ്രായമാകൽ തടയുന്നതിലും ഇതിന്റെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ പ്രാഥമികമായി ഇൻ വിട്രോയിലും ഇൻ വിവോ പരീക്ഷണങ്ങളിലും സാധൂകരിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. എന്നിരുന്നാലും, മനുഷ്യ രോഗപ്രതിരോധ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ PFC യെക്കുറിച്ചുള്ള ഗവേഷണത്തിൽ ഇപ്പോഴും ഒരു വിടവ് ഉണ്ട്.

മനുഷ്യശരീരത്തിലെ ഏറ്റവും ശക്തമായ സ്പെഷ്യലൈസ്ഡ് ആന്റിജൻ-പ്രസന്റിംഗ് കോശങ്ങളാണ് ഡെൻഡ്രിറ്റിക് സെല്ലുകൾ (DCs). മനുഷ്യശരീരത്തിലെ DC-കളുടെ എണ്ണം വളരെ ചെറുതാണ്, കൂടാതെ സൈറ്റോകൈൻ മധ്യസ്ഥതയിലുള്ള ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷൻ മോഡൽ, അതായത് ഹ്യൂമൻ പെരിഫറൽ ബ്ലഡ് മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെൽ-ഡിറൈവ്ഡ് DCs (moDCs) സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. 1992-ലാണ് ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് DC മോഡൽ ആദ്യമായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത്, ഇത് DC-കൾക്കുള്ള പരമ്പരാഗത കൾച്ചർ സിസ്റ്റമാണ്. സാധാരണയായി, ഇതിന് 6-7 ദിവസം കൃഷി ആവശ്യമാണ്. പക്വതയില്ലാത്ത DC-കൾ (PBS ഗ്രൂപ്പ്) ലഭിക്കുന്നതിന് ഗ്രാനുലോസൈറ്റ് മാക്രോഫേജ് കോളനി-സ്റ്റിമുലേറ്റിംഗ് ഫാക്ടർ (GM-CSF), ഇന്റർല്യൂക്കിൻ (IL) -4 എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് മൗസ് ബോൺ മാരോ സെല്ലുകൾ കൾച്ചർ ചെയ്യാം. സൈറ്റോകൈനുകൾ പക്വതയുള്ള ഉത്തേജകമായി ചേർത്ത് പക്വതയുള്ള DC-കൾ ലഭിക്കുന്നതിന് 1-2 ദിവസം കൾച്ചർ ചെയ്യുന്നു. മറ്റൊരു പഠനം റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തത്, ശുദ്ധീകരിച്ച മനുഷ്യ CD14+കോശങ്ങളെ ഇന്റർഫെറോൺ – β (IFN – β) അല്ലെങ്കിൽ IL-4 ഉപയോഗിച്ച് 5 ദിവസത്തേക്ക് കൾച്ചർ ചെയ്ത ശേഷം, ട്യൂമർ നെക്രോസിസ് ഫാക്ടർ-എ (TNF-a) ഉപയോഗിച്ച് കൾച്ചർ ചെയ്ത് 2 ദിവസത്തേക്ക് കൾച്ചർ ചെയ്തു, അങ്ങനെ CD11c, CD83 എന്നിവയുടെ ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള DC-കൾ ലഭിച്ചു. ഇവയ്ക്ക് അലോജെനിക് CD4+T കോശങ്ങളുടെയും CD8+T കോശങ്ങളുടെയും വ്യാപനത്തെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാനുള്ള ശക്തമായ കഴിവുണ്ട്. പ്രകൃതിദത്ത സ്രോതസ്സുകളിൽ നിന്നുള്ള നിരവധി പോളിസാക്രറൈഡുകൾക്ക് മികച്ച ഇമ്മ്യൂണോമോഡുലേറ്ററി പ്രവർത്തനമുണ്ട്, ഉദാഹരണത്തിന് ഷിറ്റേക്ക് കൂണുകളിൽ നിന്നുള്ള പോളിസാക്രറൈഡുകൾ, സ്പ്ലിറ്റ് ഗിൽ കൂൺ, യുൻഷി കൂൺ, പോറിയ കൊക്കോസ് എന്നിവ ക്ലിനിക്കൽ പ്രാക്ടീസിൽ പ്രയോഗിച്ചിട്ടുണ്ട്. ശരീരത്തിന്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം ഫലപ്രദമായി മെച്ചപ്പെടുത്താനും പ്രതിരോധശേഷി വർദ്ധിപ്പിക്കാനും ആന്റി-ട്യൂമർ ചികിത്സയ്ക്കുള്ള അനുബന്ധ ചികിത്സകളായി വർത്തിക്കാനും അവയ്ക്ക് കഴിയും. എന്നിരുന്നാലും, മനുഷ്യ രോഗപ്രതിരോധ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ PFC-യെക്കുറിച്ചുള്ള ഗവേഷണ റിപ്പോർട്ടുകൾ കുറവാണ്. അതിനാൽ, ഒരു സ്വാഭാവിക രോഗപ്രതിരോധ മോഡുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ PFC-യുടെ സാധ്യതകൾ വിലയിരുത്തുന്നതിന്, moDC-കളുടെ പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിൽ PFC-യുടെ പങ്കിനെയും അനുബന്ധ സംവിധാനങ്ങളെയും കുറിച്ചുള്ള പ്രാഥമിക ഗവേഷണം ഈ ലേഖനം നടത്തുന്നു.

മനുഷ്യ കലകളിലെ ഡിസികളുടെ അനുപാതം വളരെ കുറവായതിനാലും എലി ഡിസികൾക്കും മനുഷ്യ ഡിസികൾക്കും ഇടയിലുള്ള ഉയർന്ന അന്തർ സ്പീഷീസ് സംരക്ഷണം മൂലവും, കുറഞ്ഞ ഡിസി ഉത്പാദനം മൂലമുണ്ടാകുന്ന ഗവേഷണ ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ പരിഹരിക്കുന്നതിനായി, മനുഷ്യ പെരിഫറൽ രക്ത മോണോ ന്യൂക്ലിയർ കോശങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഡിസികളുടെ ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷൻ മോഡലുകൾ പഠിച്ചിട്ടുണ്ട്, ഇവയ്ക്ക് കുറഞ്ഞ സമയത്തിനുള്ളിൽ നല്ല രോഗപ്രതിരോധശേഷിയുള്ള ഡിസികൾ ലഭിക്കും. അതിനാൽ, ഈ പഠനം മനുഷ്യ ഡിസികളെ ഇൻ വിട്രോയിൽ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള പരമ്പരാഗത രീതി ഉപയോഗിച്ചു: rhGM CSF, rhIL-4 ഇൻ വിട്രോ എന്നിവ സഹ-കൾച്ചർ ചെയ്യുക, മറ്റെല്ലാ ദിവസവും മീഡിയം മാറ്റുക, 5-ാം ദിവസം പക്വതയില്ലാത്ത ഡിസികൾ നേടുക; ആറാം ദിവസം, ഗ്രൂപ്പിംഗ് അനുസരിച്ച് PBS, PFC, LPS എന്നിവയുടെ തുല്യ അളവുകൾ ചേർത്ത് മനുഷ്യ പെരിഫറൽ രക്ത മോണോ ന്യൂക്ലിയർ കോശങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ ഡിസികളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള കൾച്ചർ പ്രോട്ടോക്കോളായി 24 മണിക്കൂർ കൾച്ചർ ചെയ്തു.

പ്രകൃതിദത്ത ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ പോളിസാക്രറൈഡുകൾക്ക് കുറഞ്ഞ വിഷാംശം, ഇമ്മ്യൂണോസ്റ്റിമുലന്റുകൾ എന്ന നിലയിൽ കുറഞ്ഞ വില എന്നീ ഗുണങ്ങളുണ്ട്. പ്രാഥമിക പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് ശേഷം, ഇൻ വിട്രോയിൽ പ്രേരിതമായ മനുഷ്യ പെരിഫറൽ രക്ത മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെൽ-ഡിറൈവ്ഡ് ഡിസി കോശങ്ങളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ പിഎഫ്‌സി പക്വമായ മാർക്കർ സിഡി 83 ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങളുടെ ഗവേഷണ സംഘം കണ്ടെത്തി. ഫ്ലോ സൈറ്റോമെട്രി ഫലങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് 24 മണിക്കൂർ 10 μg/mL സാന്ദ്രതയിൽ പിഎഫ്‌സി ഇടപെടൽ ഡിസികളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ പക്വമായ മാർക്കർ സിഡി 83 ന്റെ പീക്ക് എക്സ്പ്രഷനിൽ കലാശിച്ചു എന്നാണ്, ഇത് ഡിസികൾ പക്വമായ അവസ്ഥയിലേക്ക് പ്രവേശിച്ചുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. അതിനാൽ, ഇൻ വിട്രോ ഇൻഡക്ഷനും ഇന്റർവെൻഷൻ പ്ലാനും ഞങ്ങളുടെ ഗവേഷണ സംഘം നിർണ്ണയിച്ചു. ഡിസികളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ സിഡി 83 ഒരു പ്രധാന പക്വമായ ബയോമാർക്കറാണ്, അതേസമയം സിഡി 86 ഡിസികളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ ഒരു പ്രധാന സഹ-ഉത്തേജക തന്മാത്രയായി വർത്തിക്കുന്നു, ടി സെല്ലുകൾ സജീവമാക്കുന്നതിനുള്ള രണ്ടാമത്തെ സിഗ്നലായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു. സിഡി 83, സിഡി 86 എന്നീ രണ്ട് ബയോമാർക്കറുകളുടെ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ എക്സ്പ്രഷൻ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് പിഎഫ്‌സി മനുഷ്യ പെരിഫറൽ രക്ത മോണോ ന്യൂക്ലിയർ സെൽ-ഡിറൈവ്ഡ് ഡിസികളുടെ പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു എന്നാണ്, ഇത് പിഎഫ്‌സിക്ക് ഡിസികളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ സൈറ്റോകൈനുകളുടെ സ്രവണം ഒരേസമയം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയുമെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. അതിനാൽ, ഈ പഠനം DC-കൾ ELISA ഉപയോഗിച്ച് സ്രവിക്കുന്ന സൈറ്റോകൈനുകൾ IL-6, TNF-a, IL-10 എന്നിവയുടെ അളവ് വിലയിരുത്തി. IL-10 DC-കളുടെ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുതയുമായി അടുത്ത ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുതയുള്ള DC-കൾ സാധാരണയായി ട്യൂമർ ചികിത്സയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് അവയവം മാറ്റിവയ്ക്കലിൽ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുതയ്ക്കുള്ള സാധ്യതയുള്ള ചികിത്സാ ആശയങ്ങൾ നൽകുന്നു; 1L-6 കുടുംബം സഹജവും അഡാപ്റ്റീവ് പ്രതിരോധശേഷി, ഹെമറ്റോപോയിസിസ്, ആന്റി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി ഇഫക്റ്റുകൾ എന്നിവയിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു; Th17 കോശങ്ങളുടെ വ്യത്യാസത്തിൽ IL-6 ഉം TGF β ഉം സംയുക്തമായി പങ്കെടുക്കുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്ന പഠനങ്ങളുണ്ട്; ഒരു വൈറസ് ശരീരത്തെ ആക്രമിക്കുമ്പോൾ, വൈറസ് സജീവമാക്കലിനോടുള്ള പ്രതികരണമായി DC-കൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന TNF-a, DC പക്വതയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു ഓട്ടോക്രൈൻ പക്വത ഘടകമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു. TNF-a തടയുന്നത് DC-കളെ പക്വതയില്ലാത്ത ഘട്ടത്തിലേക്ക് നയിക്കും, ഇത് അവയുടെ ആന്റിജൻ അവതരണ പ്രവർത്തനം പൂർണ്ണമായി പ്രയോഗിക്കുന്നതിൽ നിന്ന് തടയുന്നു. ഈ പഠനത്തിലെ ELISA ഡാറ്റ കാണിക്കുന്നത് PFC ഗ്രൂപ്പിലെ IL-10 ന്റെ സ്രവ നില മറ്റ് രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളെ അപേക്ഷിച്ച് ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു എന്നാണ്, ഇത് PFC DC-കളുടെ രോഗപ്രതിരോധ സഹിഷ്ണുത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു; IL-6, TNF-a എന്നിവയുടെ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന സ്രവ നിലകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് T സെൽ വ്യത്യാസം പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിന് DC വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന്റെ ഫലം PFC-ക്ക് ഉണ്ടായേക്കാമെന്നാണ്.