Полісахарид з хлорели (ПФК), як природний полісахарид, останніми роками привернув значну увагу вчених завдяки своїм перевагам низької токсичності, малого числа побічних ефектів та широкого спектру дії. Його функції щодо зниження рівня ліпідів у крові, протипухлинної, протизапальної дії, боротьби з хворобою Паркінсона, боротьби зі старінням тощо були попередньо підтверджені експериментами in vitro та in vivo. Однак, дослідження ПФК як імуномодулятора людини все ще мають прогалину.

Дендритні клітини (ДК) є найпотужнішими спеціалізованими антигенпрезентуючими клітинами в організмі людини. Кількість ДК в організмі людини надзвичайно мала, і зазвичай використовується модель індукції in vitro, опосередкована цитокінами, а саме ДК, отримані з мононуклеарних клітин периферичної крові людини (мДК). Модель індукованих ДК in vitro вперше була описана в 1992 році, що є традиційною системою культивування ДК. Як правило, вона вимагає культивування протягом 6-7 днів. Клітини кісткового мозку миші можна культивувати з гранулоцитарно-макрофагальним колонієстимулюючим фактором (GM-CSF) та інтерлейкіном (IL)-4 для отримання незрілих ДК (група PBS). Цитокіни додаються як зрілі стимулятори та культивуються протягом 1-2 днів для отримання зрілих ДК. В іншому дослідженні повідомлялося, що очищені людські CD14+ клітини культивували з інтерфероном-β (IFN-β) або IL-4 протягом 5 днів, а потім культивували з фактором некрозу пухлини-α (TNF-α) протягом 2 днів для отримання дендритних клітин (ДК) з високою експресією CD11c та CD83, які мають сильнішу здатність сприяти проліферації алогенних CD4+T-клітин та CD8+T-клітин. Численні полісахариди з природних джерел мають чудову імуномодулюючу активність, такі як полісахариди з грибів шиїтаке, грибів роздвоєних зябер, грибів Юньчжі та Poria cocos, які застосовувалися в клінічній практиці. Вони можуть ефективно покращувати імунну функцію організму, підвищувати імунітет та служити допоміжною терапією для протипухлинного лікування. Однак існує мало дослідницьких повідомлень про ПФК як імуномодулятор людини. Тому в цій статті проводиться попереднє дослідження ролі та пов'язаних з нею механізмів ПФК у сприянні дозріванню мДК, щоб оцінити потенціал ПФК як природного імуномодулятора.

Через надзвичайно низьку частку дендритних клітин (ДК) у тканинах людини та високу міжвидову консервативність між ДК миші та ДК людини, для вирішення труднощів дослідження, спричинених низьким рівнем продукції ДК, були досліджені моделі індукції in vitro ДК, отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини, що дозволяє отримати ДК з хорошою імуногенністю за короткий проміжок часу. Тому в цьому дослідженні використовувався традиційний метод індукції ДК людини in vitro: спільне культивування rhGM CSF та rhIL-4 in vitro, зміна середовища через день та отримання незрілих ДК на 5-й день; на 6-й день додавали рівні об'єми PBS, PFC та LPS відповідно до групування та культивували протягом 24 годин як протокол культивування для індукції ДК, отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини.

Полісахариди, отримані з натуральних продуктів, мають переваги низької токсичності та низької вартості як імуностимулятори. Після попередніх експериментів наша дослідницька група виявила, що ПФК значно посилює зрілий маркер CD83 на поверхні дендритних клітин (ДК), отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини, індукованих in vitro. Результати проточної цитометрії показали, що втручання ПФК у концентрації 10 мкг/мл протягом 24 годин призвело до пікової експресії зрілого маркера CD83 на поверхні ДК, що свідчить про те, що ДК вступили у зрілий стан. Тому наша дослідницька група визначила план індукції та втручання in vitro. CD83 є важливим зрілим біомаркером на поверхні ДК, тоді як CD86 служить важливою костимуляторною молекулою на поверхні ДК, діючи як другий сигнал для активації Т-клітин. Підвищена експресія двох біомаркерів CD83 та CD86 вказує на те, що ПФК сприяє дозріванню ДК, отриманих з мононуклеарних клітин периферичної крові людини, що свідчить про те, що ПФК може одночасно підвищувати рівень секреції цитокінів на поверхні ДК. Отже, у цьому дослідженні було оцінено рівні цитокінів IL-6, TNF-α та IL-10, що секретуються дендритними клітинами (ДК), за допомогою ELISA. IL-10 тісно пов'язаний з імунною толерантністю ДК, і ДК з імунною толерантністю зазвичай використовуються в лікуванні пухлин, що надає потенційні терапевтичні ідеї для імунної толерантності при трансплантації органів; Сімейство 1L-6 відіграє важливу роль у вродженому та адаптивному імунітеті, кровотворенні та протизапальній дії; Існують дослідження, які вказують на те, що IL-6 та TGF β спільно беруть участь у диференціації клітин Th17; Коли організм вражається вірусом, TNF-α, що виробляється ДК у відповідь на активацію вірусу, діє як аутокринний фактор дозрівання, що сприяє дозріванню ДК. Блокування TNF-α переводить ДК у незрілу стадію, запобігаючи їм повноцінно виконувати свою функцію презентації антигену. Дані ELISA в цьому дослідженні показали, що рівень секреції IL-10 у групі PFC був значно підвищений порівняно з двома іншими групами, що свідчить про те, що ПК посилює імунну толерантність ДК; Збільшення рівня секреції IL-6 та TNF-α свідчить про те, що префронтальна кора (ПФК) може посилювати дендритні клітини (ДК) для сприяння диференціації Т-клітин.