Polysacharid z Chlorelly (PFC), jakožto přírodní polysacharid, v posledních letech přitahuje velkou pozornost vědců díky svým výhodám, jako je nízká toxicita, málo vedlejších účinků a širokospektrální účinek. Jeho funkce při snižování krevních lipidů, protinádorové, protizánětlivé účinky, účinky proti Parkinsonově chorobě, proti stárnutí atd. byly předběžně ověřeny v experimentech in vitro a in vivo. Ve výzkumu PFC jako modulátoru lidské imunity však stále existuje mezera.

Dendritické buňky (DC) jsou nejsilnější specializované antigen prezentující buňky v lidském těle. Počet DC v lidském těle je extrémně malý a běžně se používá model indukce in vitro zprostředkovaný cytokiny, konkrétně DC odvozené z lidských mononukleárních buněk periferní krve (moDC). Model indukovaných DC in vitro byl poprvé popsán v roce 1992 a představuje tradiční kultivační systém pro DC. Obecně vyžaduje kultivaci po dobu 6–7 dnů. Myší buňky kostní dřeně lze kultivovat s faktorem stimulujícím kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF) a interleukinem (IL)-4 za účelem získání nezralých DC (skupina PBS). Cytokiny se přidávají jako zralé stimuly a kultivují se po dobu 1–2 dnů za účelem získání zralých DC. Jiná studie uvádí, že purifikované lidské CD14+ buňky byly kultivovány s interferonem-β (IFN-β) nebo IL-4 po dobu 5 dnů a poté kultivovány s tumor nekrotizujícím faktorem-a (TNF-a) po dobu 2 dnů za účelem získání DC s vysokou expresí CD11c a CD83, které mají silnější schopnost podporovat proliferaci alogenních CD4+T buněk a CD8+T buněk. Řada polysacharidů z přírodních zdrojů má vynikající imunomodulační aktivitu, jako jsou polysacharidy z hub shiitake, hub s dělenými žabery, hub Yunzhi a Poria cocos, které byly použity v klinické praxi. Mohou účinně zlepšit imunitní funkce těla, posílit imunitu a sloužit jako adjuvantní terapie pro protinádorovou léčbu. Existuje však jen málo výzkumných zpráv o PFC jako lidském imunomodulátoru. Proto tento článek provádí předběžný výzkum role a souvisejících mechanismů PFC při podpoře zrání moDC, aby se vyhodnotil potenciál PFC jako přirozeného imunomodulátoru.

Vzhledem k extrémně nízkému podílu dendritických buněk (DC) v lidských tkáních a vysoké mezidruhové konzervaci mezi myšími a lidskými DC byly za účelem vyřešení výzkumných obtíží způsobených nízkou produkcí DC studovány in vitro indukční modely DC odvozených z mononukleárních buněk lidské periferní krve, které umožňují získat DC s dobrou imunogenicitou v krátkém časovém období. Tato studie proto použila tradiční metodu indukce lidských DC in vitro: kokultivaci rhGM CSF a rhIL-4 in vitro, výměnu média obden a získání nezralých DC 5. den. 6. den byly přidány stejné objemy PBS, PFC a LPS podle seskupení a kultivovány po dobu 24 hodin jako kultivační protokol pro indukci DC odvozených z mononukleárních buněk lidské periferní krve.

Polysacharidy odvozené z přírodních produktů mají výhody nízké toxicity a nízkých nákladů jako imunostimulanty. Po předběžných experimentech naše výzkumná skupina zjistila, že PFC významně zvyšuje zralý marker CD83 na povrchu DC buněk odvozených z mononukleárních buněk lidské periferní krve indukovaných in vitro. Výsledky průtokové cytometrie ukázaly, že intervence PFC v koncentraci 10 μg/ml po dobu 24 hodin vedla k vrcholové expresi zralého markeru CD83 na povrchu DC, což naznačuje, že DC vstoupily do zralého stavu. Naše výzkumná skupina proto stanovila plán indukce a intervence in vitro. CD83 je důležitý zralý biomarker na povrchu DC, zatímco CD86 slouží jako důležitá kostimulační molekula na povrchu DC a působí jako druhý signál pro aktivaci T buněk. Zvýšená exprese dvou biomarkerů CD83 a CD86 naznačuje, že PFC podporuje zrání DC odvozených z mononukleárních buněk lidské periferní krve, což naznačuje, že PFC může současně zvyšovat hladinu sekrece cytokinů na povrchu DC. Tato studie proto hodnotila hladiny cytokinů IL-6, TNF-a a IL-10 vylučovaných dendritickými buňkami (DC) pomocí metody ELISA. IL-10 úzce souvisí s imunitní tolerancí DC a DC s imunitní tolerancí se běžně používají při léčbě nádorů, což poskytuje potenciální terapeutické nápady pro imunitní toleranci při transplantaci orgánů. Rodina 1L-6 hraje důležitou roli ve vrozené a adaptivní imunitě, hematopoéze a protizánětlivých účincích. Existují studie naznačující, že IL-6 a TGF β se společně podílejí na diferenciaci buněk Th17. Když je tělo napadeno virem, TNF-a produkovaný DC v reakci na aktivaci viru působí jako autokrinní faktor zrání, který podporuje zrání DC. Blokování TNF-a uvede DC do nezralého stádia, což jim zabrání v plném výkonu jejich funkce prezentace antigenu. Data ELISA v této studii ukázala, že hladina sekrece IL-10 ve skupině PFC byla významně zvýšena ve srovnání s ostatními dvěma skupinami, což naznačuje, že PFC zvyšuje imunitní toleranci DC. Zvyšující se hladiny sekrece IL-6 a TNF-α naznačují, že PFC může mít účinek zvýšení DC a podpořit diferenciaci T buněk.