क्लोरेला से प्राप्त पॉलीसेकेराइड (पीएफसी), एक प्राकृतिक पॉलीसेकेराइड होने के नाते, हाल के वर्षों में कम विषाक्तता, कम दुष्प्रभावों और व्यापक प्रभाव जैसे गुणों के कारण विद्वानों का ध्यान आकर्षित कर रहा है। रक्त में वसा की मात्रा कम करने, ट्यूमर रोधी, सूजन रोधी, पार्किंसंस रोग रोधी, वृद्धावस्था रोधी आदि में इसके कार्यों को इन विट्रो और इन विवो प्रयोगों में प्रारंभिक रूप से प्रमाणित किया जा चुका है। हालांकि, मानव प्रतिरक्षा प्रणाली को नियंत्रित करने वाले कारक के रूप में पीएफसी पर शोध में अभी भी कुछ कमी है।

डेंड्रिटिक कोशिकाएं (डीसी) मानव शरीर में सबसे शक्तिशाली विशिष्ट प्रतिजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाएं हैं। मानव शरीर में डीसी की संख्या अत्यंत कम होती है, और आमतौर पर साइटोकाइन-मध्यस्थता वाले इन विट्रो प्रेरण मॉडल, अर्थात् मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिका-व्युत्पन्न डीसी (एमओडीसी) का उपयोग किया जाता है। इन विट्रो प्रेरित डीसी मॉडल की पहली रिपोर्ट 1992 में प्रकाशित हुई थी, जो डीसी के लिए पारंपरिक संवर्धन प्रणाली है। सामान्यतः, इसके लिए 6-7 दिनों के संवर्धन की आवश्यकता होती है। अपरिपक्व डीसी (पीबीएस समूह) प्राप्त करने के लिए माउस अस्थि मज्जा कोशिकाओं को ग्रैनुलोसाइट मैक्रोफेज कॉलोनी-उत्तेजक कारक (जीएम-सीएसएफ) और इंटरल्यूकिन (आईएल)-4 के साथ संवर्धित किया जा सकता है। परिपक्व उत्तेजना के रूप में साइटोकाइन मिलाए जाते हैं और परिपक्व डीसी प्राप्त करने के लिए 1-2 दिनों तक संवर्धित किया जाता है। एक अन्य अध्ययन में बताया गया है कि शुद्ध मानव CD14+ कोशिकाओं को इंटरफेरॉन-β (IFN-β) या IL-4 के साथ 5 दिनों तक संवर्धित किया गया, और फिर ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर-α (TNF-α) के साथ 2 दिनों तक संवर्धित करके CD11c और CD83 की उच्च अभिव्यक्ति वाले DC प्राप्त किए गए, जिनमें एलोजेनिक CD4+T कोशिकाओं और CD8+T कोशिकाओं के प्रसार को बढ़ावा देने की अधिक क्षमता होती है। प्राकृतिक स्रोतों से प्राप्त कई पॉलीसेकेराइड में उत्कृष्ट प्रतिरक्षा-संशोधन गतिविधि होती है, जैसे कि शिटाके मशरूम, स्प्लिट गिल मशरूम, युनझी मशरूम और पोरिया कोकोस से प्राप्त पॉलीसेकेराइड, जिनका नैदानिक ​​अभ्यास में उपयोग किया गया है। ये शरीर की प्रतिरक्षा कार्यप्रणाली को प्रभावी ढंग से सुधार सकते हैं, रोग प्रतिरोधक क्षमता बढ़ा सकते हैं और ट्यूमर-रोधी उपचार के लिए सहायक उपचार के रूप में कार्य कर सकते हैं। हालांकि, मानव प्रतिरक्षा संशोधक के रूप में PFC पर बहुत कम शोध रिपोर्टें हैं। इसलिए, यह लेख प्राकृतिक प्रतिरक्षा नियंत्रक के रूप में पीएफसी की क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए, मोडीसी के परिपक्वता को बढ़ावा देने में पीएफसी की भूमिका और संबंधित तंत्रों पर प्रारंभिक शोध करता है।

मानव ऊतकों में डीसी कोशिकाओं का अनुपात अत्यंत कम होने और चूहे तथा मानव डीसी कोशिकाओं के बीच अंतर-प्रजाति संरक्षण अधिक होने के कारण, डीसी कोशिकाओं के कम उत्पादन से उत्पन्न अनुसंधान संबंधी कठिनाइयों को दूर करने के लिए, मानव परिधीय रक्त एकनाभिकीय कोशिकाओं से प्राप्त डीसी कोशिकाओं के इन विट्रो प्रेरण मॉडल का अध्ययन किया गया है, जिससे कम समय में अच्छी प्रतिरक्षाजनकता वाली डीसी कोशिकाएं प्राप्त की जा सकती हैं। अतः, इस अध्ययन में मानव डीसी कोशिकाओं को इन विट्रो में प्रेरित करने की पारंपरिक विधि का उपयोग किया गया: आरएचजीएम सीएसएफ और आरएचआईएल-4 को इन विट्रो में सह-संवर्धन करना, माध्यम को हर दूसरे दिन बदलना और 5वें दिन अपरिपक्व डीसी कोशिकाएं प्राप्त करना; 6वें दिन, समूह के अनुसार पीबीएस, पीएफसी और एलपीएस की समान मात्रा मिलाकर 24 घंटे तक संवर्धन करना, मानव परिधीय रक्त एकनाभिकीय कोशिकाओं से प्राप्त डीसी कोशिकाओं को प्रेरित करने के संवर्धन प्रोटोकॉल के अनुसार किया गया।

प्राकृतिक उत्पादों से प्राप्त पॉलीसेकेराइड (पीएफसी) प्रतिरक्षा उत्तेजक के रूप में कम विषाक्तता और कम लागत के लाभ प्रदान करते हैं। प्रारंभिक प्रयोगों के बाद, हमारे शोध समूह ने पाया कि पीएफसी (PFC) इन विट्रो में प्रेरित मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर सेल-व्युत्पन्न डीसी कोशिकाओं की सतह पर परिपक्व मार्कर CD83 को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ाता है। फ्लो साइटोमेट्री के परिणामों से पता चला कि 10 μg/mL की सांद्रता पर 24 घंटे के लिए पीएफसी के हस्तक्षेप से डीसी की सतह पर परिपक्व मार्कर CD83 की अभिव्यक्ति चरम पर पहुंच गई, जो दर्शाता है कि डीसी परिपक्व अवस्था में प्रवेश कर गए हैं। इसलिए, हमारे शोध समूह ने इन विट्रो प्रेरण और हस्तक्षेप योजना निर्धारित की। CD83 डीसी की सतह पर एक महत्वपूर्ण परिपक्व बायोमार्कर है, जबकि CD86 डीसी की सतह पर एक महत्वपूर्ण सह-उत्तेजक अणु के रूप में कार्य करता है, जो टी कोशिकाओं को सक्रिय करने के लिए दूसरे संकेत के रूप में कार्य करता है। दो बायोमार्कर CD83 और CD86 की बढ़ी हुई अभिव्यक्ति यह दर्शाती है कि PFC मानव परिधीय रक्त मोनोसाइट कोशिकाओं से उत्पन्न DCs के परिपक्वन को बढ़ावा देता है, जिससे यह संकेत मिलता है कि PFC साथ ही साथ DCs की सतह पर साइटोकाइन के स्राव स्तर को भी बढ़ा सकता है। इसलिए, इस अध्ययन में ELISA का उपयोग करके DCs द्वारा स्रावित साइटोकाइन IL-6, TNF-α और IL-10 के स्तर का मूल्यांकन किया गया। IL-10 DCs की प्रतिरक्षा सहनशीलता से निकटता से संबंधित है, और प्रतिरक्षा सहनशीलता वाले DCs का उपयोग आमतौर पर ट्यूमर के उपचार में किया जाता है, जो अंग प्रत्यारोपण में प्रतिरक्षा सहनशीलता के लिए संभावित चिकित्सीय विचार प्रदान करता है; IL-6 परिवार जन्मजात और अनुकूली प्रतिरक्षा, रक्त निर्माण और सूजन-रोधी प्रभावों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है; ऐसे अध्ययन हैं जो संकेत देते हैं कि IL-6 और TGF β संयुक्त रूप से Th17 कोशिकाओं के विभेदन में भाग लेते हैं; जब शरीर में वायरस का आक्रमण होता है, तो वायरस सक्रियण की प्रतिक्रिया में DCs द्वारा उत्पादित TNF-α एक ऑटोक्रीन परिपक्वन कारक के रूप में कार्य करता है और DC परिपक्वन को बढ़ावा देता है। TNF-α को अवरुद्ध करने से DC अपरिपक्व अवस्था में चले जाते हैं, जिससे वे अपने प्रतिजन प्रस्तुति कार्य को पूरी तरह से करने में असमर्थ हो जाते हैं। इस अध्ययन में ELISA डेटा से पता चला कि PFC समूह में IL-10 का स्राव स्तर अन्य दो समूहों की तुलना में काफी बढ़ गया था, जो दर्शाता है कि PFC DC की प्रतिरक्षा सहनशीलता को बढ़ाता है; IL-6 और TNF-α के बढ़ते स्राव स्तर से संकेत मिलता है कि PFC DC को T कोशिका विभेदन को बढ़ावा देने में सहायक हो सकता है।