Polisaharid iz Chlorella (PFC) kot naravni polisaharid je v zadnjih letih pritegnil veliko pozornosti znanstvenikov zaradi svojih prednosti nizke toksičnosti, malo stranskih učinkov in širokega spektra učinkov. Njegove funkcije pri zniževanju lipidov v krvi, protitumorskem in protivnetnem delovanju, delovanju proti Parkinsonovi bolezni, staranju itd. so bile predhodno potrjene s poskusi in vitro in in vivo. Vendar pa v raziskavah o PFC kot modulatorju človeškega imunskega sistema še vedno obstaja vrzel.

Dendritične celice (DC) so najmočnejše specializirane celice, ki predstavljajo antigen v človeškem telesu. Število DC v človeškem telesu je izjemno majhno, zato se pogosto uporablja model indukcije in vitro, ki ga posredujejo citokini, in sicer DC, pridobljene iz mononuklearnih celic periferne krvi (moDC), ki jih pridobimo iz človeških perifernih krvnih mononuklearnih celic. Model induciranih DC in vitro je bil prvič opisan leta 1992 in je tradicionalni sistem gojenja DC. Na splošno zahteva gojenje 6-7 dni. Mišje celice kostnega mozga lahko gojimo z granulocitno-makrofagnim kolonijsko stimulirajočim faktorjem (GM-CSF) in interlevkinom (IL)-4, da dobimo nezrele DC (skupina PBS). Citokini se dodajo kot zreli dražljaji in gojijo 1-2 dni, da dobimo zrele DC. Druga študija je poročala, da so prečiščene človeške celice CD14+ gojili z interferonom β (IFN β) ali IL-4 5 dni, nato pa 2 dni s faktorjem tumorske nekroze α (TNF-α), da bi dobili dendritične celice (DC) z visoko ekspresijo CD11c in CD83, ki imajo močnejšo sposobnost spodbujanja proliferacije alogenskih celic CD4+T in CD8+T. Številni polisaharidi iz naravnih virov imajo odlično imunomodulatorno aktivnost, kot so polisaharidi iz šitake gob, gob z razcepljenimi škrgami, gob Yunzhi in Poria cocos, ki se uporabljajo v klinični praksi. Učinkovito lahko izboljšajo imunsko funkcijo telesa, okrepijo imunost in služijo kot adjuvantne terapije za protitumorsko zdravljenje. Vendar pa je malo raziskovalnih poročil o PFC kot modulatorju človeškega imunskega sistema. Zato ta članek izvaja predhodne raziskave o vlogi in sorodnih mehanizmih PFC pri spodbujanju zorenja mDC, da bi ocenili potencial PFC kot naravnega modulatorja imunskega sistema.

Zaradi izjemno nizkega deleža dendritičnih celic (DC) v človeških tkivih in visoke medvrstne ohranjenosti med mišjimi in človeškimi DC so bili za rešitev raziskovalnih težav, ki jih povzroča nizka produkcija DC, preučeni in vitro indukcijski modeli DC, pridobljenih iz mononuklearnih celic človeške periferne krvi, s katerimi je mogoče v kratkem času pridobiti DC z dobro imunogenostjo. Zato je bila v tej študiji uporabljena tradicionalna metoda indukcije človeških DC in vitro: sočasno gojenje rhGM CSF in rhIL-4 in vitro, menjava medija vsak drugi dan in pridobitev nezrelih DC 5. dan; 6. dan so bili dodani enaki volumni PBS, PFC in LPS glede na skupino in gojeni 24 ur kot protokol gojenja za indukcijo DC, pridobljenih iz mononuklearnih celic človeške periferne krvi.

Polisaharidi, pridobljeni iz naravnih produktov, imajo prednosti nizke toksičnosti in nizkih stroškov kot imunostimulanti. Po predhodnih poskusih je naša raziskovalna skupina ugotovila, da PFC znatno poveča zreli marker CD83 na površini DC celic, pridobljenih iz mononuklearnih celic periferne krvi pri ljudeh, induciranih in vitro. Rezultati pretočne citometrije so pokazali, da je intervencija PFC v koncentraciji 10 μg/ml 24 ur povzročila najvišjo ekspresijo zrelega markerja CD83 na površini DC, kar kaže na to, da so DC vstopile v zrelo stanje. Zato je naša raziskovalna skupina določila načrt indukcije in intervencije in vitro. CD83 je pomemben zreli biomarker na površini DC, medtem ko CD86 služi kot pomembna kostimulatorna molekula na površini DC in deluje kot drugi signal za aktivacijo celic T. Povečana ekspresija dveh biomarkerjev CD83 in CD86 kaže, da PFC spodbuja zorenje DC, pridobljenih iz mononuklearnih celic periferne krvi pri ljudeh, kar kaže na to, da lahko PFC hkrati poveča raven izločanja citokinov na površini DC. Zato je ta študija z uporabo ELISA ocenila ravni citokinov IL-6, TNF-a in IL-10, ki jih izločajo DC. IL-10 je tesno povezan z imunsko toleranco DC, DC z imunsko toleranco pa se pogosto uporabljajo pri zdravljenju tumorjev, kar ponuja potencialne terapevtske ideje za imunsko toleranco pri presaditvi organov; Družina 1L-6 igra pomembno vlogo pri prirojeni in prilagodljivi imunosti, hematopoezi in protivnetnih učinkih; Obstajajo študije, ki kažejo, da IL-6 in TGF β skupaj sodelujeta pri diferenciaciji celic Th17; Ko telo napade virus, TNF-a, ki ga proizvajajo DC kot odziv na aktivacijo virusa, deluje kot avtokrini faktor zorenja, ki spodbuja dozorevanje DC. Blokiranje TNF-a bo DC postavilo v nezrelo fazo in jim preprečilo, da bi v celoti izvajale svojo funkcijo predstavitve antigena. Podatki ELISA v tej študiji so pokazali, da je bila raven izločanja IL-10 v skupini PFC bistveno povečana v primerjavi z drugima dvema skupinama, kar kaže, da PFC izboljša imunsko toleranco DC; Naraščajoče ravni izločanja IL-6 in TNF-α kažejo, da ima lahko PFC učinek povečanja DC za spodbujanje diferenciacije T-celic.