Polysaccharid fra Chlorella (PFC) har som et naturligt polysaccharid tiltrukket sig stor opmærksomhed fra forskere i de senere år på grund af dets fordele ved lav toksicitet, få bivirkninger og bredspektrede effekter. Dets funktioner i sænkning af blodlipider, antitumor, antiinflammatorisk, anti Parkinsons, anti-aging osv. er blevet foreløbigt valideret in vitro- og in vivo-eksperimenter. Der er dog stadig et hul i forskningen i PFC som en human immunmodulator.

Dendritiske celler (DC'er) er de kraftigste specialiserede antigenpræsenterende celler i menneskekroppen. Antallet af DC'er i menneskekroppen er ekstremt lille, og en cytokinmedieret in vitro-induktionsmodel, nemlig humane perifere blodmononukleære celleafledte DC'er (moDC'er), anvendes almindeligvis. Den in vitro-inducerede DC-model blev først rapporteret i 1992, hvilket er det traditionelle kultursystem for DC'er. Generelt kræver det dyrkning i 6-7 dage. Museknoglemarvsceller kan dyrkes med granulocytmakrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF) og interleukin (IL) -4 for at opnå umodne DC'er (PBS-gruppe). Cytokiner tilsættes som modne stimuli og dyrkes i 1-2 dage for at opnå modne DC'er. Et andet studie rapporterede, at oprensede humane CD14+-celler blev dyrket med interferon-β (IFN-β) eller IL-4 i 5 dage og derefter dyrket med tumornekrosefaktor-a (TNF-a) i 2 dage for at opnå dendritiske celler (DC'er) med høj ekspression af CD11c og CD83, som har en stærkere evne til at fremme proliferationen af ​​allogene CD4+T-celler og CD8+T-celler. Talrige polysaccharider fra naturlige kilder har fremragende immunmodulerende aktivitet, såsom polysaccharider fra shiitakesvampe, flækkede gællesvampe, Yunzhi-svampe og Poria cocos, som er blevet anvendt i klinisk praksis. De kan effektivt forbedre kroppens immunfunktion, styrke immuniteten og tjene som adjuverende terapier til antitumorbehandling. Der er dog få forskningsrapporter om PFC som en human immunmodulator. Derfor udfører denne artikel indledende forskning i PFC's rolle og relaterede mekanismer i at fremme modningen af ​​moDC'er for at evaluere potentialet af PFC som en naturlig immunmodulator.

På grund af den ekstremt lave andel af dendritiske celler (DC'er) i humant væv og den høje interartskonservering mellem muse-DC'er og humane DC'er, er der for at løse de forskningsvanskeligheder, der er forårsaget af lav DC-produktion, blevet undersøgt in vitro-induktionsmodeller af DC'er afledt af humane perifere blodmononukleære celler, som kan opnå DC'er med god immunogenicitet på kort tid. Derfor anvendte denne undersøgelse den traditionelle metode til at inducere humane DC'er in vitro: co-dyrkning af rhGM CSF og rhIL-4 in vitro, skift af mediet hver anden dag og opnåelse af umodne DC'er på den 5. dag. På den 6. dag blev lige store mængder PBS, PFC og LPS tilsat i henhold til gruppering og dyrket i 24 timer som kulturprotokol til induktion af DC'er afledt af humane perifere blodmononukleære celler.

Polysaccharider udvundet af naturlige produkter har fordelene ved lav toksicitet og lave omkostninger som immunstimulerende midler. Efter indledende eksperimenter fandt vores forskergruppe, at PFC signifikant forstærker den modne markør CD83 på overfladen af ​​humane perifere blodmononukleære celleafledte DC-celler induceret in vitro. Flowcytometri-resultater viste, at PFC-intervention ved en koncentration på 10 μg/ml i 24 timer resulterede i en peak-ekspression af den modne markør CD83 på overfladen af ​​DC'er, hvilket indikerer, at DC'er er gået ind i en moden tilstand. Derfor bestemte vores forskergruppe in vitro-induktions- og interventionsplanen. CD83 er en vigtig moden biomarkør på overfladen af ​​DC'er, mens CD86 fungerer som et vigtigt co-stimulerende molekyle på overfladen af ​​DC'er, der fungerer som det andet signal til aktivering af T-celler. Den forbedrede ekspression af to biomarkører CD83 og CD86 indikerer, at PFC fremmer modningen af ​​humane perifere blodmononukleære celleafledte DC'er, hvilket tyder på, at PFC samtidig kan øge sekretionsniveauet af cytokiner på overfladen af ​​DC'er. Derfor evaluerede denne undersøgelse niveauerne af cytokinerne IL-6, TNF-a og IL-10 udskilt af dendritiske celler ved hjælp af ELISA. IL-10 er tæt forbundet med dendritiske cellers immuntolerance, og dendritiske celler med immuntolerance anvendes almindeligvis i tumorbehandling og giver potentielle terapeutiske ideer til immuntolerance ved organtransplantation. 1L-6-familien spiller en vigtig rolle i medfødt og adaptiv immunitet, hæmatopoiese og antiinflammatoriske virkninger. Der er undersøgelser, der indikerer, at IL-6 og TGF β i fællesskab deltager i differentieringen af ​​Th17-celler. Når kroppen invaderes af en virus, fungerer den TNF-a, der produceres af dendritiske celler som reaktion på virusaktivering, som en autokrin modningsfaktor, der fremmer dendritiske cellers modning. Blokering af TNF-a vil sætte dendritiske celler i et umodent stadie og forhindre dem i at udøve deres antigenpræsentationsfunktion fuldt ud. ELISA-dataene i denne undersøgelse viste, at sekretionsniveauet af IL-10 i PFC-gruppen var signifikant forhøjet sammenlignet med de to andre grupper, hvilket indikerer, at PFC forbedrer dendritiske cellers immuntolerance. De stigende sekretionsniveauer af IL-6 og TNF-a antyder, at PFC kan have den effekt, at den forstærker DC, hvilket fremmer T-celledifferentiering.