Təbii polisaxarid olan Xlorelladan (PFC) əldə edilən polisaxarid, aşağı toksiklik, aşağı yan təsirlər və geniş spektrli təsirlər kimi üstünlüklərinə görə son illərdə alimlərin diqqətini cəlb etmişdir. Onun qan lipidlərini azaltmaq, şiş əleyhinə, iltihab əleyhinə, Parkinson əleyhinə, yaşlanma əleyhinə və s. kimi funksiyaları əvvəlcədən in vitro və in vivo təcrübələrdə təsdiqlənmişdir. Bununla belə, PFC-nin insan immun modulyatoru kimi tədqiqatlarında hələ də boşluqlar mövcuddur.

Dendritik hüceyrələr (DC) insan bədənində ən güclü ixtisaslaşmış antigen təqdim edən hüceyrələrdir. İnsan bədənindəki DC-lərin sayı olduqca azdır və in vitro induksiya modeli, yəni insan periferik qan mononükleer hüceyrələrindən əldə edilən DC-lər (moDC) geniş istifadə olunur. In vitro induksiyalı DC modeli ilk dəfə 1992-ci ildə bildirilmişdir ki, bu da DC-lər üçün ənənəvi becərmə sistemidir. Ümumiyyətlə, 6-7 gün becərmə tələb olunur. Yetkin olmayan DC-lər (PBS qrupu) əldə etmək üçün siçan sümük iliyi hüceyrələri qranulosit makrofaq koloniyasını stimullaşdıran faktor (GM-CSF) və interlökin (IL) -4 ilə becərilə bilər. Yetkin DC-lər əldə etmək üçün sitokinlər yetkin stimul kimi əlavə edilir və 1-2 gün becərilir. Başqa bir tədqiqatda bildirilir ki, təmizlənmiş insan CD14+ hüceyrələri 5 gün ərzində interferon – β (IFN – β) və ya IL-4 ilə becərilir və sonra 2 gün ərzində şiş nekrozu faktoru-a (TNF-a) ilə becərilir ki, bu da allogenik CD4+T hüceyrələrinin və CD8+T hüceyrələrinin proliferasiyasını təşviq etmək üçün daha güclü qabiliyyətə malik CD11c və CD83 ifadəsi yüksək olan DC-lər əldə edilsin. Təbii mənbələrdən alınan çoxsaylı polisaxaridlər, məsələn, klinik praktikada tətbiq olunan şiitake göbələklərindən, parçalanmış qəlsəmə göbələklərindən, Yunzhi göbələklərindən və Poria cocos-dan alınan polisaxaridlər əla immunomodulyator aktivliyə malikdir. Onlar bədənin immun funksiyasını effektiv şəkildə yaxşılaşdıra, immuniteti artıra və şiş əleyhinə müalicə üçün köməkçi terapiya kimi xidmət edə bilər. Bununla belə, PFC-nin insan immun modulyatoru kimi istifadəsi ilə bağlı az sayda tədqiqat hesabatı mövcuddur. Buna görə də, bu məqalədə PFC-nin təbii immun modulyator kimi potensialını qiymətləndirmək üçün moDC-lərin yetkinləşməsini təşviq etməkdə PFC-nin rolu və əlaqəli mexanizmləri barədə ilkin tədqiqat aparılır.

İnsan toxumalarında DC-lərin olduqca aşağı nisbəti və siçan DC-ləri ilə insan DC-ləri arasında növlərarası yüksək qorunma səbəbindən, aşağı DC istehsalının yaratdığı tədqiqat çətinliklərini həll etmək üçün, qısa müddət ərzində yaxşı immunogenliyə malik DC-lər əldə edə bilən insan periferik qan mononuklear hüceyrələrindən əldə edilən DC-lərin in vitro induksiya modelləri öyrənilmişdir. Buna görə də, bu tədqiqatda insan DC-lərinin in vitro induksiyasının ənənəvi metodundan istifadə edilmişdir: in vitro rhGM CSF və rhIL-4-ün birgə becərilməsi, mühitin hər iki gün dəyişdirilməsi və 5-ci gündə yetişməmiş DC-lərin əldə edilməsi; 6-cı gündə qruplaşdırmaya uyğun olaraq bərabər miqdarda PBS, PFC və LPS əlavə edilmiş və insan periferik qan mononuklear hüceyrələrindən əldə edilən DC-lərin induksiyası üçün becərmə protokolu olaraq 24 saat becərilmişdir.

Təbii məhsullardan əldə edilən polisaxaridlər immunostimulyator kimi aşağı toksiklik və aşağı qiymət üstünlüklərinə malikdir. İlkin təcrübələrdən sonra tədqiqat qrupumuz PFC-nin in vitro induksiya edilmiş insan periferik qan mononuklear hüceyrələrindən əldə edilən DC hüceyrələrinin səthindəki yetkin marker CD83-ü əhəmiyyətli dərəcədə artırdığını aşkar etdi. Axın sitometriyasının nəticələri göstərdi ki, 24 saat ərzində 10 μ q/ml konsentrasiyada PFC müdaxiləsi DC-lərin səthində yetkin marker CD83-ün pik ifadəsinə səbəb oldu ki, bu da DC-lərin yetkin vəziyyətə keçdiyini göstərir. Buna görə də, tədqiqat qrupumuz in vitro induksiya və müdaxilə planını müəyyən etdi. CD83 DC-lərin səthində vacib bir yetkin biomarkerdir, CD86 isə DC-lərin səthində vacib bir kostimulyator molekulu kimi xidmət edir və T hüceyrələrini aktivləşdirmək üçün ikinci siqnal kimi çıxış edir. İki CD83 və CD86 biomarkerinin artan ifadəsi PFC-nin insan periferik qan mononuklear hüceyrələrindən əldə edilən DC-lərin yetkinləşməsini təşviq etdiyini göstərir ki, bu da PFC-nin DC-lərin səthində sitokinlərin sekresiya səviyyəsini eyni vaxtda artıra biləcəyini göstərir. Buna görə də, bu tədqiqatda ELISA istifadə edərək DC-lər tərəfindən ifraz olunan IL-6, TNF-a və IL-10 sitokinlərinin səviyyələri qiymətləndirilmişdir. IL-10 DC-lərin immun tolerantlığı ilə sıx bağlıdır və immun tolerantlığı olan DC-lər şiş müalicəsində geniş istifadə olunur və orqan transplantasiyasında immun tolerantlığı üçün potensial terapevtik fikirlər təqdim edir; 1L-6 ailəsi anadangəlmə və adaptiv immunitetdə, hematopoezdə və iltihab əleyhinə təsirlərdə mühüm rol oynayır; IL-6 və TGF β-nın Th17 hüceyrələrinin differensiasiyasında birgə iştirak etdiyini göstərən tədqiqatlar mövcuddur; Bədən virus tərəfindən işğal edildikdə, DC-lər tərəfindən virusun aktivləşməsinə cavab olaraq istehsal edilən TNF-a, DC-nin yetkinləşməsini təşviq etmək üçün autokrin yetkinləşmə amili kimi çıxış edir. TNF-a-nın bloklanması DC-ləri yetkinləşməmiş mərhələyə salacaq və onların antigen təqdimat funksiyasını tam şəkildə yerinə yetirməsinə mane olacaq. Bu tədqiqatdakı ELISA məlumatları göstərdi ki, PFC qrupunda IL-10 ifraz səviyyəsi digər iki qrupla müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır ki, bu da PFC-nin DC-lərin immun tolerantlığını artırdığını göstərir; IL-6 və TNF-a-nın artan sekresiya səviyyələri, PFC-nin T hüceyrələrinin differensiasiyasını təşviq etmək üçün DC-ni gücləndirmək təsirinə malik ola biləcəyini göstərir.