O polisacárido de Chlorella (PFC), como polisacárido natural, atraeu moita atención dos estudosos nos últimos anos debido ás súas vantaxes de baixa toxicidade, baixos efectos secundarios e efectos de amplo espectro. As súas funcións na redución dos lípidos sanguíneos, antitumorais, antiinflamatorias, antipárkinsonianas, antienvellecemento, etc. foron validadas preliminarmente en experimentos in vitro e in vivo. Non obstante, aínda hai unha lagoa na investigación sobre o PFC como modulador inmunitario humano.

As células dendríticas (DC) son as células presentadoras de antíxenos especializadas máis potentes do corpo humano. O número de DC no corpo humano é extremadamente pequeno e úsase habitualmente un modelo de indución in vitro mediado por citocinas, concretamente as DC derivadas de células mononucleares do sangue periférico humano (moDC). O modelo de DC inducida in vitro describiuse por primeira vez en 1992 e é o sistema de cultivo tradicional para as DC. Xeralmente, require un cultivo de 6 a 7 días. As células da medula ósea de rato pódense cultivar con factor estimulante de colonias de granulocitos e macrófagos (GM-CSF) e interleucina (IL) -4 para obter DC inmaduras (grupo PBS). Engádense citocinas como estímulos maduros e cultívanse durante 1 ou 2 días para obter DC maduras. Outro estudo informou de que se cultivaron células CD14+ humanas purificadas con interferón-β (IFN-β) ou IL-4 durante 5 días e, a continuación, cultiváronse con factor de necrose tumoral-a (TNF-a) durante 2 días para obter células dendríticas (DCs) con alta expresión de CD11c e CD83, que teñen unha maior capacidade para promover a proliferación de células T CD4+ e CD8+ alóxenas. Numerosos polisacáridos de fontes naturais teñen unha excelente actividade inmunomoduladora, como os polisacáridos dos cogomelos shiitake, os cogomelos de branquias partidas, os cogomelos Yunzhi e a Poria cocos, que se aplicaron na práctica clínica. Poden mellorar eficazmente a función inmunitaria do corpo, potenciar a inmunidade e servir como terapias adxuvantes para o tratamento antitumoral. Non obstante, hai poucos informes de investigación sobre o PFC como modulador inmunitario humano. Polo tanto, este artigo realiza unha investigación preliminar sobre o papel e os mecanismos relacionados do PFC na promoción da maduración das moDCs, co fin de avaliar o potencial do PFC como modulador inmunitario natural.

Debido á proporción extremadamente baixa de DCs nos tecidos humanos e á alta conservación interespecie entre as DCs de rato e as DCs humanas, co fin de resolver as dificultades de investigación causadas pola baixa produción de DCs, estudáronse modelos de indución in vitro de DCs derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano, que permiten obter DCs con boa inmunoxenicidade nun curto período de tempo. Polo tanto, este estudo empregou o método tradicional de inducción de DCs humanas in vitro: cocultivando rhGM CSF e rhIL-4 in vitro, cambiando o medio cada dous días e obtendo DCs inmaduras no quinto día; no sexto día, engadíronse volumes iguais de PBS, PFC e LPS segundo a agrupación e cultiváronse durante 24 horas como protocolo de cultivo para inducir DCs derivadas de células mononucleares de sangue periférico humano.

Os polisacáridos derivados de produtos naturais teñen as vantaxes dunha baixa toxicidade e un baixo custo como inmunoestimulantes. Tras experimentos preliminares, o noso grupo de investigación descubriu que o PFC mellora significativamente o marcador maduro CD83 na superficie das células dendríticas derivadas de células mononucleares do sangue periférico humano inducidas in vitro. Os resultados da citometría de fluxo mostraron que a intervención do PFC a unha concentración de 10 μ g/mL durante 24 horas deu lugar a unha expresión máxima do marcador maduro CD83 na superficie das DC, o que indica que as DC entraron nun estado maduro. Polo tanto, o noso grupo de investigación determinou o plan de indución e intervención in vitro. O CD83 é un biomarcador maduro importante na superficie das DC, mentres que o CD86 serve como unha importante molécula coestimuladora na superficie das DC, actuando como o segundo sinal para a activación das células T. A expresión mellorada de dous biomarcadores CD83 e CD86 indica que o PFC promove a maduración das DC derivadas de células mononucleares do sangue periférico humano, o que suxire que o PFC pode aumentar simultaneamente o nivel de secreción de citocinas na superficie das DC. Polo tanto, este estudo avaliou os niveis de citocinas IL-6, TNF-a e IL-10 segregadas polas DC mediante ELISA. A IL-10 está estreitamente relacionada coa tolerancia inmunitaria das DC, e as DC con tolerancia inmunitaria úsanse habitualmente no tratamento de tumores, o que proporciona posibles ideas terapéuticas para a tolerancia inmunitaria no transplante de órganos; A familia 1L-6 desempeña un papel importante na inmunidade innata e adaptativa, a hematopoese e os efectos antiinflamatorios; Hai estudos que indican que a IL-6 e o ​​TGF β participan conxuntamente na diferenciación das células Th17; Cando o corpo é invadido por un virus, o TNF-a producido polas DC en resposta á activación do virus actúa como un factor de maduración autócrina para promover a maduración das DC. O bloqueo do TNF-a colocará as DC nunha fase inmatura, impedíndolles exercer plenamente a súa función de presentación de antíxenos. Os datos de ELISA neste estudo mostraron que o nivel de secreción de IL-10 no grupo PFC aumentou significativamente en comparación cos outros dous grupos, o que indica que o PFC mellora a tolerancia inmunitaria das DC; O aumento dos niveis de secreción de IL-6 e TNF-α suxire que a PFC pode ter o efecto de mellorar as células dendríticas para promover a diferenciación das células T.