Полисахаридот од хлорелата (PFC), како природен полисахарид, привлече големо внимание од научниците во последниве години поради неговите предности на ниска токсичност, ниски несакани ефекти и широк спектар на ефекти. Неговите функции во намалувањето на липидите во крвта, антитуморските, антиинфламаторните, антипаркинсонова, антистареечките итн. се прелиминарно потврдени in vitro и in vivo експерименти. Сепак, сè уште постои празнина во истражувањата за PFC како човечки имунолошки модулатор.

Дендритичните клетки (ДК) се најмоќните специјализирани клетки што презентираат антигени во човечкото тело. Бројот на ДК во човечкото тело е исклучително мал, а најчесто се користи ин витро индукциски модел со посредство на цитокини, имено ДК добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв (моДК). Моделот на ДК индуциран ин витро за прв пат е објавен во 1992 година, што е традиционален систем на култура за ДК. Општо земено, тој бара култивација од 6-7 дена. Клетките од коскена срцевина од глувци можат да се култивираат со фактор за стимулирање на колонии на гранулоцитни макрофаги (GM-CSF) и интерлеукин (IL) -4 за да се добијат незрели ДК (PBS група). Цитокините се додаваат како зрели стимули и се култивираат 1-2 дена за да се добијат зрели ДК. Друга студија објави дека прочистени човечки CD14+ клетки биле култивирани со интерферон-β (IFN-β) или IL-4 во тек на 5 дена, а потоа култивирани со фактор на туморска некроза-а (TNF-a) во тек на 2 дена за да се добијат ДК со висока експресија на CD11c и CD83, кои имаат посилна способност да ја промовираат пролиферацијата на алогени CD4+Т клетки и CD8+Т клетки. Бројни полисахариди од природни извори имаат одлична имуномодулаторна активност, како што се полисахаридите од печурките шитаке, печурките со разделени жабри, печурките Yunzhi и Poria cocos, кои се применети во клиничката пракса. Тие можат ефикасно да ја подобрат имунолошката функција на телото, да го зајакнат имунитетот и да послужат како адјувантни терапии за антитуморски третман. Сепак, постојат малку истражувачки извештаи за PFC како човечки имунолошки модулатор. Затоа, овој напис спроведува прелиминарни истражувања за улогата и поврзаните механизми на PFC во промовирањето на созревањето на moDC, со цел да се процени потенцијалот на PFC како природен имунолошки модулатор.

Поради екстремно нискиот процент на ДК во човечките ткива и високата меѓувидова конзервација помеѓу глувчешките и човечките ДК, со цел да се решат тешкотиите во истражувањето предизвикани од ниското производство на ДК, проучени се ин витро индукциски модели на ДК добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв, кои можат да добијат ДК со добра имуногеност за краток временски период. Затоа, оваа студија го користеше традиционалниот метод за индуцирање на човечки ДК ин витро: кокултивирање на rhGM CSF и rhIL-4 ин витро, менување на медиумот секој втор ден и добивање на незрели ДК на 5-тиот ден; На 6-тиот ден, беа додадени еднакви волумени на PBS, PFC и LPS според групирањето и култивирани 24 часа како протокол за култура за индуцирање на ДК добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв.

Полисахаридите добиени од природни производи имаат предности како ниска токсичност и ниска цена како имуностимуланси. По прелиминарните експерименти, нашата истражувачка група откри дека PFC значително го подобрува зрелиот маркер CD83 на површината на клетките на DC добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв индуцирани in vitro. Резултатите од проточната цитометрија покажаа дека интервенцијата на PFC со концентрација од 10 μ g/mL во тек на 24 часа резултирала со врвна експресија на зрелиот маркер CD83 на површината на DC, што укажува дека DC влегле во зрела состојба. Затоа, нашата истражувачка група го одреди планот за индукција и интервенција in vitro. CD83 е важен зрел биомаркер на површината на DC, додека CD86 служи како важна костимулаторна молекула на површината на DC, дејствувајќи како втор сигнал за активирање на Т-клетките. Зголемената експресија на два биомаркери CD83 и CD86 укажува дека PFC го промовира созревањето на DC добиени од мононуклеарни клетки од човечка периферна крв, што сугерира дека PFC може истовремено да го зголеми нивото на секреција на цитокини на површината на DC. Затоа, оваа студија ги оцени нивоата на цитокини IL-6, TNF-a и IL-10 што ги лачат ДК користејќи ELISA. IL-10 е тесно поврзан со имунолошката толеранција на ДК, а ДК со имунолошка толеранција најчесто се користат во третманот на тумори, обезбедувајќи потенцијални терапевтски идеи за имунолошка толеранција при трансплантација на органи; Семејството 1L-6 игра важна улога во вродениот и адаптивниот имунитет, хематопоезата и антиинфламаторните ефекти; Постојат студии што укажуваат дека IL-6 и TGF β заеднички учествуваат во диференцијацијата на Th17 клетките; Кога телото е нападнато од вирус, TNF-a произведен од ДК како одговор на активирањето на вирусот делува како автокрин фактор на созревање за да се промовира созревањето на ДК. Блокирањето на TNF-a ќе ги стави ДК во незрела фаза, спречувајќи ги целосно да ја извршуваат својата функција за презентација на антиген. Податоците од ELISA во оваа студија покажаа дека нивото на секреција на IL-10 во групата PFC е значително зголемено во споредба со другите две групи, што укажува дека PFC ја подобрува имунолошката толеранција на ДК; Зголемените нивоа на секреција на IL-6 и TNF-a сугерираат дека PFC може да има ефект на подобрување на DC за да се промовира диференцијација на Т-клетките.