Поліцукрыд з хларэлы (ПФК), як натуральны поліцукрыд, у апошнія гады прыцягнуў вялікую ўвагу навукоўцаў дзякуючы сваёй нізкай таксічнасці, малой колькасці пабочных эфектаў і шырокаму спектру дзеяння. Яго функцыі па зніжэнні ўзроўню ліпідаў у крыві, супрацьпухлінным, супрацьзапаленчым, супраць хваробы Паркінсана, антыстарэння і г.д. былі папярэдне пацверджаны ў эксперыментах in vitro і in vivo. Аднак у даследаваннях ПФК як імунамадулятара чалавека ўсё яшчэ існуе прабел.

Дэндрытныя клеткі (ДК) — найбольш магутныя спецыялізаваныя антыгенпрэзентуючыя клеткі ў арганізме чалавека. Колькасць ДК у арганізме чалавека надзвычай малая, і звычайна выкарыстоўваецца мадэль індукцыі in vitro, апасродкаваная цытакінамі, а менавіта ДК, атрыманыя з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека (мДК). Мадэль ДК, індукаваных in vitro, была ўпершыню апісана ў 1992 годзе і з'яўляецца традыцыйнай сістэмай культывавання ДК. Як правіла, яна патрабуе культывавання на працягу 6-7 дзён. Клеткі касцявога мозгу мышэй можна культываваць з гранулацытна-макрафагальным калонійстымулюючым фактарам (GM-CSF) і інтэрлейкінам (IL)-4 для атрымання няспелых ДК (група PBS). Цытакіны дадаюцца ў якасці спелых стымулаў і культывуюцца на працягу 1-2 дзён для атрымання спелых ДК. У іншым даследаванні паведамлялася, што ачышчаныя чалавечыя клеткі CD14+ культывавалі з інтэрферонам-β (IFN-β) або IL-4 на працягу 5 дзён, а затым культывавалі з фактарам некрозу пухліны-α (TNF-α) на працягу 2 дзён для атрымання дендрытных клетак (ДК) з высокай экспрэсіяй CD11c і CD83, якія валодаюць больш моцнай здольнасцю спрыяць праліферацыі алогенных CD4+T-клетак і CD8+T-клетак. Шматлікія поліцукрыды з прыродных крыніц валодаюць выдатнай імунамадулюючай актыўнасцю, такія як поліцукрыды з грыбоў шыітаке, грыбоў з расшчапленымі жабрамі, грыбоў юньчжы і какосавай порыі, якія былі ўжытыя ў клінічнай практыцы. Яны могуць эфектыўна паляпшаць імунную функцыю арганізма, павышаць імунітэт і служыць дапаможнай тэрапіяй для супрацьпухліннага лячэння. Аднак існуе няшмат даследчых паведамленняў аб ПФК як імунамадулятары чалавека. Таму ў гэтым артыкуле праводзіцца папярэдняе даследаванне ролі і звязаных з ёй механізмаў ПФК у садзейнічанні паспяванню мДК, каб ацаніць патэнцыял ПФК як натуральнага імунамадулятара.

З-за надзвычай нізкай долі дендрытных клетак (ДК) у тканінах чалавека і высокай міжвідавай захаванасці паміж ДК мышэй і ДК чалавека, для вырашэння цяжкасцей даследавання, выкліканых нізкай вытворчасцю ДК, былі вывучаны мадэлі індукцыі ДК in vitro, атрыманых з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека, якія дазваляюць атрымаць ДК з добрай імунагеннасцю за кароткі прамежак часу. Таму ў гэтым даследаванні выкарыстоўваўся традыцыйны метад індукцыі ДК чалавека in vitro: сумеснае культываванне rhGM CSF і rhIL-4 in vitro, змена асяроддзя праз дзень і атрыманне няспелых ДК на 5-ы дзень; на 6-ы дзень дадавалі роўныя аб'ёмы PBS, PFC і LPS у адпаведнасці з групаваннем і культывавалі на працягу 24 гадзін у адпаведнасці з пратаколам культывавання для індукцыі ДК, атрыманых з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека.

Поліцукрыды, атрыманыя з натуральных прадуктаў, маюць перавагі нізкай таксічнасці і нізкай кошту ў якасці імунастымулятараў. Пасля папярэдніх эксперыментаў наша даследчая група выявіла, што ПФК значна ўзмацняе спелы маркер CD83 на паверхні монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека, індукаваных in vitro. Вынікі праточнай цытаметрыі паказалі, што ўмяшанне ПФК у канцэнтрацыі 10 мкг/мл на працягу 24 гадзін прывяло да пікавай экспрэсіі спелага маркера CD83 на паверхні дендрытных клетак (ДК), што сведчыць аб тым, што ДК перайшлі ў спелы стан. Такім чынам, наша даследчая група вызначыла план індукцыі і ўмяшання in vitro. CD83 з'яўляецца важным спелым біямаркерам на паверхні ДК, у той час як CD86 служыць важнай костымулюючай малекулай на паверхні ДК, дзейнічаючы як другі сігнал для актывацыі Т-клетак. Павышаная экспрэсія двух біямаркераў CD83 і CD86 сведчыць аб тым, што ПФК спрыяе паспяванню ДК, атрыманых з монануклеарных клетак перыферычнай крыві чалавека, што сведчыць аб тым, што ПФК можа адначасова павялічваць узровень сакрэцыі цытакінаў на паверхні ДК. Такім чынам, у гэтым даследаванні з дапамогай ІФА ацэньваліся ўзроўні цытакінаў IL-6, TNF-α і IL-10, якія вылучаюцца ДК. IL-10 цесна звязаны з імуннай талерантнасцю ДК, і ДК з імуннай талерантнасцю звычайна выкарыстоўваюцца ў лячэнні пухлін, што дае патэнцыйныя тэрапеўтычныя ідэі для імуннай талерантнасці пры трансплантацыі органаў; Сямейства 1L-6 адыгрывае важную ролю ва ўроджаным і адаптыўным імунітэце, гематапаэзе і супрацьзапаленчых эфектах; Ёсць даследаванні, якія паказваюць, што IL-6 і TGF β сумесна ўдзельнічаюць у дыферэнцыяцыі клетак Th17; Калі арганізм атакуецца вірусам, TNF-α, які выпрацоўваецца ДК у адказ на актывацыю віруса, дзейнічае як аўтакрынны фактар ​​паспявання, каб спрыяць паспяванню ДК. Блакаванне TNF-α пераводзіць ДК у няспелую стадыю, перашкаджаючы ім цалкам выконваць сваю функцыю прэзентацыі антыгена. Дадзеныя ІФА ў гэтым даследаванні паказалі, што ўзровень сакрэцыі IL-10 у групе ПФК быў значна павялічаны ў параўнанні з двума іншымі групамі, што сведчыць аб тым, што ПФК павышае імунную талерантнасць ДК; Павелічэнне ўзроўню сакрэцыі IL-6 і TNF-α сведчыць аб тым, што ПФК можа ўзмацняць DC, што спрыяе дыферэнцыяцыі Т-клетак.