ქლორელას პოლისაქარიდმა (PFC), როგორც ბუნებრივმა პოლისაქარიდმა, ბოლო წლებში მეცნიერების დიდი ყურადღება მიიპყრო მისი დაბალი ტოქსიკურობის, გვერდითი მოვლენების დაბალი რაოდენობისა და ფართო სპექტრის ეფექტების უპირატესობების გამო. მისი ფუნქციები სისხლში ლიპიდების დონის შემცირებაში, სიმსივნის საწინააღმდეგო, ანთების საწინააღმდეგო, პარკინსონის დაავადების საწინააღმდეგო, დაბერების საწინააღმდეგო და ა.შ. წინასწარ დადასტურებულია in vitro და in vivo ექსპერიმენტებში. თუმცა, PFC-ის, როგორც ადამიანის იმუნური მოდულატორის, კვლევაში ჯერ კიდევ არის ხარვეზები.

დენდრიტული უჯრედები (DCs) ადამიანის ორგანიზმში ყველაზე ძლიერი სპეციალიზებული ანტიგენ-წარმომქმნელი უჯრედებია. ადამიანის ორგანიზმში DC-ების რაოდენობა უკიდურესად მცირეა და ფართოდ გამოიყენება ციტოკინებით განპირობებული in vitro ინდუქციის მოდელი, კერძოდ, ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედებიდან მიღებული DCs (moDCs). in vitro ინდუცირებული DC მოდელი პირველად 1992 წელს იქნა აღწერილი, რაც DC-ების ტრადიციული კულტივირების სისტემაა. ზოგადად, ის 6-7 დღის განმავლობაში კულტივირებას მოითხოვს. თაგვის ძვლის ტვინის უჯრედების კულტივირება შესაძლებელია გრანულოციტ-მაკროფაგების კოლონიის მასტიმულირებელი ფაქტორით (GM-CSF) და ინტერლეიკინით (IL) -4 მოუმწიფებელი DC-ების (PBS ჯგუფი) მისაღებად. ციტოკინები ემატება მომწიფებული სტიმულების სახით და კულტივირდება 1-2 დღის განმავლობაში მომწიფებული DC-ების მისაღებად. კიდევ ერთი კვლევის თანახმად, გაწმენდილი ადამიანის CD14+ უჯრედები კულტივირებული იქნა ინტერფერონ-β-ით (IFN-β) ან IL-4-ით 5 დღის განმავლობაში, შემდეგ კი კულტივირებული იქნა სიმსივნის ნეკროზის ფაქტორ-a-თი (TNF-a) 2 დღის განმავლობაში, რათა მიღებულ იქნას CD11c და CD83-ის მაღალი ექსპრესიის მქონე DC-ები, რომლებსაც აქვთ ალოგენური CD4+T და CD8+T უჯრედების პროლიფერაციის ხელშეწყობის უფრო ძლიერი უნარი. ბუნებრივი წყაროებიდან მიღებულ მრავალ პოლისაქარიდს აქვს შესანიშნავი იმუნომოდულატორული აქტივობა, როგორიცაა შიიტაკეს სოკოების, გაყოფილი ლაყუჩების, იუნჟის სოკოების და Poria cocos-ის პოლისაქარიდები, რომლებიც გამოიყენება კლინიკურ პრაქტიკაში. მათ შეუძლიათ ეფექტურად გააუმჯობესონ ორგანიზმის იმუნური ფუნქცია, გააძლიერონ იმუნიტეტი და ემსახურონ სიმსივნის საწინააღმდეგო მკურნალობის დამხმარე თერაპიას. თუმცა, არსებობს მცირე რაოდენობის კვლევითი ანგარიში PFC-ის, როგორც ადამიანის იმუნური მოდულატორის შესახებ. ამიტომ, ეს სტატია ატარებს წინასწარ კვლევას PFC-ის როლისა და მასთან დაკავშირებული მექანიზმების შესახებ moDC-ების მომწიფების ხელშეწყობაში, რათა შეფასდეს PFC-ის, როგორც ბუნებრივი იმუნური მოდულატორის, პოტენციალი.

ადამიანის ქსოვილებში დენკ-ების უკიდურესად დაბალი პროპორციისა და თაგვისა და ადამიანის დენკ-ებს შორის სახეობებს შორის მაღალი კონსერვაციის გამო, დენკ-ების დაბალი წარმოებით გამოწვეული კვლევის სირთულეების გადასაჭრელად, შესწავლილი იქნა ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედებიდან მიღებული დენკ-ების ინ ვიტრო ინდუქციის მოდელები, რომლებიც მოკლე დროში კარგი იმუნოგენურობის მქონე დენკ-ების მიღებას უწყობენ ხელს. ამიტომ, ამ კვლევაში გამოყენებული იქნა ადამიანის დენკ-ების ინ ვიტრო ინდუქციის ტრადიციული მეთოდი: rhGM ცერებროსპინალური სითხისა და rhIL-4-ის თანაკულტივირება ინ ვიტრო, გარემოს შეცვლა დღეგამოშვებით და მოუმწიფებელი დენკ-ების მიღება მე-5 დღეს; მე-6 დღეს, დაჯგუფების მიხედვით დაემატა PBS, PFC და LPS-ის თანაბარი მოცულობები და კულტივირებული იქნა 24 საათის განმავლობაში, როგორც ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედებიდან მიღებული დენკ-ების ინდუცირების კულტურული პროტოკოლი.

ბუნებრივი პროდუქტებიდან მიღებულ პოლისაქარიდებს, როგორც იმუნოსტიმულატორებს, აქვთ დაბალი ტოქსიკურობისა და დაბალი ღირებულების უპირატესობები. წინასწარი ექსპერიმენტების შემდეგ, ჩვენმა კვლევითმა ჯგუფმა დაადგინა, რომ PFC მნიშვნელოვნად აძლიერებს მომწიფებულ მარკერ CD83-ს ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედებიდან მიღებული DC უჯრედების ზედაპირზე, რომლებიც ინ ვიტრო იყო ინდუცირებული. ნაკადური ციტომეტრიის შედეგებმა აჩვენა, რომ PFC-ის ჩარევა 10 μ გ/მლ კონცენტრაციით 24 საათის განმავლობაში იწვევდა მომწიფებული მარკერის CD83 პიკურ ექსპრესიას DC-ების ზედაპირზე, რაც მიუთითებს, რომ DC-ები მომწიფებულ მდგომარეობაში შევიდნენ. ამიტომ, ჩვენმა კვლევითმა ჯგუფმა განსაზღვრა in vitro ინდუქციისა და ჩარევის გეგმა. CD83 არის მნიშვნელოვანი მომწიფებული ბიომარკერი DC-ების ზედაპირზე, ხოლო CD86 ასრულებს მნიშვნელოვან კოსტიმულატორულ მოლეკულას DC-ების ზედაპირზე, რომელიც მოქმედებს როგორც მეორე სიგნალი T უჯრედების გააქტიურებისთვის. ორი ბიომარკერის, CD83-ის და CD86-ის გაძლიერებული ექსპრესია მიუთითებს, რომ PFC ხელს უწყობს ადამიანის პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედებიდან მიღებული DC-ების მომწიფებას, რაც იმაზე მიუთითებს, რომ PFC-მა შეიძლება ერთდროულად გაზარდოს ციტოკინების სეკრეციის დონე DC-ების ზედაპირზე. ამგვარად, ამ კვლევაში შეფასდა DC-ების მიერ გამოყოფილი ციტოკინების IL-6, TNF-a და IL-10 დონეები ELISA-ს გამოყენებით. IL-10 მჭიდრო კავშირშია DC-ების იმუნურ ტოლერანტობასთან და იმუნური ტოლერანტობის მქონე DC-ები ხშირად გამოიყენება სიმსივნის მკურნალობაში, რაც ორგანოების ტრანსპლანტაციის დროს იმუნური ტოლერანტობის პოტენციურ თერაპიულ იდეებს იძლევა; 1L-6 ოჯახი მნიშვნელოვან როლს ასრულებს თანდაყოლილ და ადაპტაციურ იმუნიტეტში, ჰემატოპოეზსა და ანთების საწინააღმდეგო ეფექტებში; არსებობს კვლევები, რომლებიც მიუთითებს, რომ IL-6 და TGF β ერთობლივად მონაწილეობენ Th17 უჯრედების დიფერენციაციაში; როდესაც ორგანიზმში ვირუსი შედის, ვირუსის აქტივაციის საპასუხოდ DC-ების მიერ გამომუშავებული TNF-a მოქმედებს როგორც აუტოკრინული მომწიფების ფაქტორი, რათა ხელი შეუწყოს DC-ების მომწიფებას. TNF-a-ს ბლოკირება DC-ებს უმწიფარ სტადიაში მოაქცევს, რაც ხელს უშლის მათ ანტიგენური პრეზენტაციის ფუნქციის სრულად გამოვლენაში. ამ კვლევაში ELISA-ს მონაცემებმა აჩვენა, რომ PFC ჯგუფში IL-10-ის სეკრეციის დონე მნიშვნელოვნად გაიზარდა სხვა ორ ჯგუფთან შედარებით, რაც მიუთითებს, რომ PFC აძლიერებს DC-ების იმუნურ ტოლერანტობას; IL-6-ის და TNF-a-ს სეკრეციის დონის მატება მიუთითებს, რომ PFC-ს შესაძლოა ჰქონდეს DC-ის გაძლიერების ეფექტი T უჯრედების დიფერენციაციის ხელშესაწყობად.