A Chlorellából származó poliszacharid (PFC), mint természetes poliszacharid, az utóbbi években nagy figyelmet kapott a tudósoktól alacsony toxicitása, kevés mellékhatása és széles spektrumú hatása miatt. Vérzsír-csökkentő, daganatellenes, gyulladáscsökkentő, Parkinson-kór elleni, öregedésgátló stb. funkcióit előzetesen validálták in vitro és in vivo kísérletekben. A PFC-vel, mint emberi immunmodulátorral kapcsolatos kutatásokban azonban még mindig hiányosságok vannak.

A dendritikus sejtek (DC-k) az emberi szervezet legerősebb specializált antigénprezentáló sejtjei. Az emberi szervezetben a DC-k száma rendkívül kicsi, és általában egy citokin-közvetített in vitro indukciós modellt, nevezetesen az emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó DC-ket (moDC-ket) használnak. Az in vitro indukált DC modellt először 1992-ben írták le, amely a DC-k hagyományos tenyésztési rendszere. Általában 6-7 napig kell tenyészteni. Az egér csontvelősejtjeit granulocita makrofág kolónia-stimuláló faktorral (GM-CSF) és interleukinnal (IL) -4-gyel tenyészthetjük, hogy éretlen DC-ket (PBS-csoport) kapjunk. Érett stimulusként citokineket adunk hozzá, és 1-2 napig tenyésztjük, hogy érett DC-ket kapjunk. Egy másik tanulmány arról számolt be, hogy tisztított humán CD14+ sejteket 5 napig interferon-β-val (IFN-β) vagy IL-4-gyel tenyésztettek, majd 2 napig tumor nekrózis faktor-α-val (TNF-α) tenyésztették, hogy magas CD11c és CD83 expressziójú DC-ket kapjanak, amelyek erősebben képesek elősegíteni az allogén CD4+T-sejtek és CD8+T-sejtek proliferációját. Számos természetes forrásból származó poliszacharid kiváló immunmoduláló aktivitással rendelkezik, mint például a shiitake gomba, a hasított kopoltyúgomba, a Yunzhi gomba és a Poria kókusz poliszacharidjai, amelyeket a klinikai gyakorlatban is alkalmaznak. Hatékonyan javíthatják a szervezet immunfunkcióját, fokozhatják az immunitást, és adjuváns terápiaként szolgálhatnak a daganatellenes kezelésben. Azonban kevés kutatási jelentés található a PFC-ről, mint emberi immunmodulátorról. Ezért ez a cikk előzetes kutatást végez a PFC szerepéről és kapcsolódó mechanizmusairól a moDC-k érésének elősegítésében, annak érdekében, hogy felmérje a PFC természetes immunmodulátorként betöltött szerepét.

Az emberi szövetekben a DC-k rendkívül alacsony aránya, valamint az egér DC-k és az emberi DC-k közötti magas fajok közötti konzerváció miatt az alacsony DC-termelés okozta kutatási nehézségek megoldása érdekében humán perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó DC-k in vitro indukciós modelljeit vizsgálták, amelyekkel rövid idő alatt jó immunogenitású DC-ket lehet előállítani. Ezért ez a tanulmány a humán DC-k in vitro indukálásának hagyományos módszerét alkalmazta: rhGM CSF és rhIL-4 együttes tenyésztése in vitro, a táptalaj kétnaponta történő cseréje, és az 5. napon éretlen DC-k kinyerése; A 6. napon a csoportosításnak megfelelően azonos térfogatú PBS-t, PFC-t és LPS-t adtunk hozzá, és 24 órán át tenyésztettük, mint az emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó DC-k indukálására szolgáló tenyésztési protokoll.

A természetes termékekből származó poliszacharidok immunstimulánsként alacsony toxicitást és alacsony költséget kínálnak. Előzetes kísérletek után kutatócsoportunk megállapította, hogy a PFC jelentősen fokozza az in vitro humán perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó DC sejtek felszínén található CD83 érett markert. Az áramlási citometriás eredmények azt mutatták, hogy a PFC beavatkozás 10 μg/ml koncentrációban 24 órán át a CD83 érett marker csúcsexpresszióját eredményezte a DC-k felszínén, ami azt jelzi, hogy a DC-k érett állapotba léptek. Ezért kutatócsoportunk meghatározta az in vitro indukciós és beavatkozási tervet. A CD83 egy fontos érett biomarker a DC-k felszínén, míg a CD86 fontos kostimulációs molekulaként szolgál a DC-k felszínén, második jelként működve a T-sejtek aktiválásához. A CD83 és CD86 biomarker fokozott expressziója azt jelzi, hogy a PFC elősegíti az emberi perifériás vér mononukleáris sejtjeiből származó DC-k érését, ami arra utal, hogy a PFC egyidejűleg növelheti a citokinek szekréciós szintjét a DC-k felszínén. Ezért ez a tanulmány ELISA segítségével értékelte a DC-k által kiválasztott IL-6, TNF-α és IL-10 citokinek szintjét. Az IL-10 szorosan összefügg a DC-k immuntoleranciájával, és az immuntoleranciával rendelkező DC-ket gyakran alkalmazzák a daganatok kezelésében, ami potenciális terápiás ötleteket kínál az immuntoleranciára szervátültetés során; Az 1L-6 család fontos szerepet játszik a veleszületett és adaptív immunitásban, a vérképzésben és a gyulladáscsökkentő hatásokban; Vannak olyan tanulmányok, amelyek azt mutatják, hogy az IL-6 és a TGF-β közösen vesznek részt a Th17 sejtek differenciálódásában; Amikor a szervezetet vírus támadja meg, a DC-k által a vírusaktivációra válaszul termelt TNF-α autokrin érési faktorként működik, elősegítve a DC-k érését. A TNF-α blokkolása éretlen stádiumba hozza a DC-ket, megakadályozva őket abban, hogy teljes mértékben kifejtsék antigénprezentációs funkciójukat. A vizsgálatban szereplő ELISA-adatok azt mutatták, hogy az IL-10 szekréciós szintje a PFC csoportban szignifikánsan megemelkedett a másik két csoporthoz képest, ami azt jelzi, hogy a PFC fokozza a DC-k immuntoleranciáját; Az IL-6 és a TNF-α növekvő szekréciós szintje arra utal, hogy a PFC fokozhatja a DC-ket, elősegítve a T-sejtek differenciálódását.