Polisakarida daripada Chlorella (PFC), sebagai polisakarida semula jadi, telah menarik banyak perhatian daripada para sarjana sejak kebelakangan ini kerana kelebihan ketoksikannya yang rendah, kesan sampingan yang rendah, dan kesan spektrum luas. Fungsinya dalam menurunkan lipid darah, anti-tumor, anti-radang, anti-Parkinson, anti-penuaan, dan sebagainya telah disahkan terlebih dahulu dalam eksperimen in vitro dan in vivo. Walau bagaimanapun, masih terdapat jurang dalam penyelidikan mengenai PFC sebagai modulator imun manusia.

Sel dendritik (DC) merupakan sel penyaji antigen khusus yang paling berkuasa dalam tubuh manusia. Bilangan DC dalam tubuh manusia adalah sangat kecil, dan model induksi in vitro yang dimediasi sitokin, iaitu DC yang berasal dari sel mononuklear darah periferi manusia (moDC), biasa digunakan. Model DC teraruh in vitro pertama kali dilaporkan pada tahun 1992, yang merupakan sistem kultur tradisional untuk DC. Secara amnya, ia memerlukan penanaman selama 6-7 hari. Sel sumsum tulang tikus boleh dikultur dengan faktor perangsang koloni makrofaj granulosit (GM-CSF) dan interleukin (IL) -4 untuk mendapatkan DC yang tidak matang (kumpulan PBS). Sitokin ditambah sebagai rangsangan matang dan dikultur selama 1-2 hari untuk mendapatkan DC matang. Satu lagi kajian melaporkan bahawa sel CD14+ manusia yang telah ditulenkan telah dikultur dengan interferon – β (IFN – β) atau IL-4 selama 5 hari, dan kemudian dikultur dengan faktor nekrosis tumor-a (TNF-a) selama 2 hari untuk mendapatkan DC dengan ekspresi CD11c dan CD83 yang tinggi, yang mempunyai keupayaan yang lebih kuat untuk menggalakkan percambahan sel CD4+T alogenik dan sel CD8+T. Banyak polisakarida daripada sumber semula jadi mempunyai aktiviti imunomodulatori yang sangat baik, seperti polisakarida daripada cendawan shiitake, cendawan insang belah, cendawan Yunzhi, dan Poria cocos, yang telah digunakan dalam amalan klinikal. Ia boleh meningkatkan fungsi imun badan dengan berkesan, meningkatkan imuniti, dan berfungsi sebagai terapi adjuvan untuk rawatan anti-tumor. Walau bagaimanapun, terdapat beberapa laporan penyelidikan mengenai PFC sebagai modulator imun manusia. Oleh itu, artikel ini menjalankan penyelidikan awal mengenai peranan dan mekanisme berkaitan PFC dalam menggalakkan kematangan moDC, untuk menilai potensi PFC sebagai modulator imun semula jadi.

Disebabkan oleh perkadaran DC yang sangat rendah dalam tisu manusia dan pemuliharaan antara spesies yang tinggi antara DC tikus dan DC manusia, untuk menyelesaikan masalah penyelidikan yang disebabkan oleh pengeluaran DC yang rendah, model induksi in vitro DC yang berasal dari sel mononuklear darah periferal manusia telah dikaji, yang dapat memperoleh DC dengan imunogenisiti yang baik dalam jangka masa yang singkat. Oleh itu, kajian ini menggunakan kaedah tradisional untuk mendorong DC manusia secara in vitro: mengkultur bersama rhGM CSF dan rhIL-4 secara in vitro, menukar medium setiap selang hari, dan mendapatkan DC yang belum matang pada hari ke-5; Pada hari ke-6, isipadu PBS, PFC, dan LPS yang sama ditambah mengikut pengelompokan dan dikultur selama 24 jam sebagai protokol kultur untuk mendorong DC yang berasal dari sel mononuklear darah periferal manusia.

Polisakarida yang berasal daripada produk semula jadi mempunyai kelebihan ketoksikan rendah dan kos rendah sebagai imunostimulan. Selepas eksperimen awal, kumpulan penyelidikan kami mendapati bahawa PFC meningkatkan penanda matang CD83 dengan ketara pada permukaan sel DC yang berasal dari sel mononuklear darah periferi manusia yang diinduksi secara in vitro. Keputusan sitometri aliran menunjukkan bahawa intervensi PFC pada kepekatan 10 μ g/mL selama 24 jam menghasilkan ekspresi puncak penanda matang CD83 pada permukaan DC, menunjukkan bahawa DC memasuki keadaan matang. Oleh itu, kumpulan penyelidikan kami menentukan pelan induksi dan intervensi in vitro. CD83 ialah penanda bio matang yang penting pada permukaan DC, manakala CD86 berfungsi sebagai molekul kostimulatori yang penting pada permukaan DC, bertindak sebagai isyarat kedua untuk mengaktifkan sel T. Ekspresi dua penanda bio CD83 dan CD86 yang dipertingkatkan menunjukkan bahawa PFC menggalakkan kematangan DC yang berasal dari sel mononuklear darah periferi manusia, menunjukkan bahawa PFC boleh meningkatkan tahap rembesan sitokin pada permukaan DC secara serentak. Oleh itu, kajian ini menilai tahap sitokin IL-6, TNF-α, dan IL-10 yang dirembeskan oleh DC menggunakan ELISA. IL-10 berkait rapat dengan toleransi imun DC, dan DC dengan toleransi imun biasanya digunakan dalam rawatan tumor, memberikan idea terapeutik yang berpotensi untuk toleransi imun dalam pemindahan organ; Keluarga 1L-6 memainkan peranan penting dalam imuniti semula jadi dan adaptif, hematopoiesis, dan kesan anti-radang; Terdapat kajian yang menunjukkan bahawa IL-6 dan TGF β bersama-sama mengambil bahagian dalam pembezaan sel Th17; Apabila badan diserang oleh virus, TNF-α yang dihasilkan oleh DC sebagai tindak balas kepada pengaktifan virus bertindak sebagai faktor kematangan autokrin untuk menggalakkan kematangan DC. Menyekat TNF-α akan meletakkan DC pada peringkat belum matang, menghalangnya daripada melaksanakan sepenuhnya fungsi pembentangan antigen mereka. Data ELISA dalam kajian ini menunjukkan bahawa tahap rembesan IL-10 dalam kumpulan PFC meningkat dengan ketara berbanding dua kumpulan lain, menunjukkan bahawa PFC meningkatkan toleransi imun DC; Peningkatan tahap rembesan IL-6 dan TNF-α menunjukkan bahawa PFC mungkin mempunyai kesan meningkatkan DC untuk menggalakkan pembezaan sel T.