Polysackarid från Chlorella (PFC), som är en naturlig polysackarid, har lockat stor uppmärksamhet från forskare de senaste åren på grund av dess fördelar med låg toxicitet, få biverkningar och bredspektrumeffekter. Dess funktioner för att sänka blodfetter, vara antitumörbekämpande, antiinflammatoriska, motverka Parkinsons sjukdom, anti-aging etc. har preliminärt validerats in vitro- och in vivo-experiment. Det finns dock fortfarande en lucka i forskningen om PFC som en mänsklig immunmodulator.

Dendritiska celler (DC) är de mest kraftfulla specialiserade antigenpresenterande cellerna i människokroppen. Antalet DC i människokroppen är extremt litet, och en cytokinmedierad in vitro-induktionsmodell, nämligen humana perifera blodmononukleära cell-deriverade DC (moDC), används ofta. Den in vitro-inducerade DC-modellen rapporterades först 1992, vilket är det traditionella odlingssystemet för DC. Generellt kräver det odling i 6-7 dagar. Musbenmärgsceller kan odlas med granulocytmakrofagkolonistimulerande faktor (GM-CSF) och interleukin (IL) -4 för att erhålla omogna DC (PBS-grupp). Cytokiner tillsätts som mogna stimuli och odlas i 1-2 dagar för att erhålla mogna DC. En annan studie rapporterade att renade humana CD14+-celler odlades med interferon-β (IFN-β) eller IL-4 i 5 dagar, och sedan odlades med tumörnekrosfaktor-a (TNF-a) i 2 dagar för att erhålla dendritiska celler (DCs) med högt uttryck av CD11c och CD83, vilka har starkare förmåga att främja proliferationen av allogena CD4+T-celler och CD8+T-celler. Många polysackarider från naturliga källor har utmärkt immunmodulerande aktivitet, såsom polysackarider från shiitakesvampar, delade gälsvampar, Yunzhi-svampar och Poria cocos, vilka har använts i klinisk praxis. De kan effektivt förbättra kroppens immunfunktion, stärka immuniteten och fungera som adjuvanta terapier för antitumörbehandling. Det finns dock få forskningsrapporter om PFC som en mänsklig immunmodulator. Därför genomför denna artikel preliminär forskning om PFC:s roll och relaterade mekanismer för att främja mognaden av mognadsceller (moDCs), i syfte att utvärdera potentialen hos PFC som en naturlig immunmodulator.

På grund av den extremt låga andelen dendritiska celler (DC) i mänskliga vävnader och den höga interartkonserveringen mellan mus-DC och humana DC, har man, för att lösa de forskningssvårigheter som orsakas av låg DC-produktion, studerat in vitro-induktionsmodeller av DC härledda från humana perifera blodmononukleära celler. Dessa modeller kan erhålla DC med god immunogenicitet på kort tid. Därför använde denna studie den traditionella metoden för att inducera humana DC in vitro: samodling av rhGM CSF och rhIL-4 in vitro, byte av medium varannan dag och erhållande av omogna DC på den 5:e dagen. På den 6:e dagen tillsattes lika volymer PBS, PFC och LPS enligt gruppering och odlades i 24 timmar som odlingsprotokoll för att inducera DC härledda från humana perifera blodmononukleära celler.

Polysackarider härledda från naturprodukter har fördelarna med låg toxicitet och låg kostnad som immunstimulerande medel. Efter preliminära experiment fann vår forskargrupp att PFC signifikant förstärker den mogna markören CD83 på ytan av humana perifera blodmononukleära cell-deriverade DC-celler inducerade in vitro. Flödescytometriresultat visade att PFC-intervention vid en koncentration av 10 μg/ml i 24 timmar resulterade i ett maximalt uttryck av den mogna markören CD83 på ytan av DC:er, vilket indikerar att DC:er har gått in i ett moget tillstånd. Därför fastställde vår forskargrupp in vitro-induktions- och interventionsplanen. CD83 är en viktig mogen biomarkör på ytan av DC:er, medan CD86 fungerar som en viktig kostimulerande molekyl på ytan av DC:er, och fungerar som den andra signalen för att aktivera T-celler. Det förbättrade uttrycket av två biomarkörer CD83 och CD86 indikerar att PFC främjar mognaden av humana perifera blodmononukleära cell-deriverade DC:er, vilket tyder på att PFC samtidigt kan öka sekretionsnivån av cytokiner på ytan av DC:er. Därför utvärderade denna studie nivåerna av cytokinerna IL-6, TNF-a och IL-10 som utsöndras av dendritiska celler med hjälp av ELISA. IL-10 är nära besläktat med immuntoleransen hos dendritiska celler, och dendritiska celler med immuntolerans används ofta vid tumörbehandling, vilket ger potentiella terapeutiska idéer för immuntolerans vid organtransplantation; 1L-6-familjen spelar en viktig roll i medfödd och adaptiv immunitet, hematopoies och antiinflammatoriska effekter; Det finns studier som indikerar att IL-6 och TGF β gemensamt deltar i differentieringen av Th17-celler; När kroppen invaderas av ett virus fungerar TNF-a som produceras av dendritiska celler som svar på virusaktivering som en autokrin mognadsfaktor för att främja dendritiska cellernas mognad. Blockering av TNF-a kommer att försätta dendritiska cellerna i ett omoget stadium, vilket hindrar dem från att fullt ut utöva sin antigenpresentationsfunktion. ELISA-data i denna studie visade att sekretionsnivån av IL-10 i PFC-gruppen var signifikant ökad jämfört med de andra två grupperna, vilket indikerar att PFC förbättrar immuntoleransen hos dendritiska celler; De ökande sekretionsnivåerna av IL-6 och TNF-a tyder på att PFC kan ha effekten att förstärka DC för att främja T-cellsdifferentiering.