Полизахаридът от хлорела (PFC), като естествен полизахарид, привлече много внимание от учените през последните години поради предимствата си на ниска токсичност, ниски странични ефекти и широкоспектърен ефект. Неговите функции за понижаване на кръвните липиди, противотуморно, противовъзпалително, противопаркинсоново, антиейджингово и др. са предварително валидирани in vitro и in vivo експерименти. Въпреки това, все още има празнина в изследванията на PFC като човешки имуномодулатор.

Дендритните клетки (ДК) са най-мощните специализирани антиген-представящи клетки в човешкото тяло. Броят на ДК в човешкото тяло е изключително малък и често се използва цитокин-медииран in vitro индукционен модел, а именно ДК, получени от човешки периферни кръвни мононуклеарни клетки (moDCs). Моделът на индуцирани in vitro ДК е описан за първи път през 1992 г. и е традиционната система за култивиране на ДК. Обикновено изисква култивиране в продължение на 6-7 дни. Клетки от костен мозък на мишки могат да се култивират с гранулоцитно-макрофагов колонии-стимулиращ фактор (GM-CSF) и интерлевкин (IL)-4, за да се получат незрели ДК (PBS група). Цитокини се добавят като зрели стимули и се култивират в продължение на 1-2 дни, за да се получат зрели ДК. Друго проучване съобщава, че пречистени човешки CD14+ клетки са култивирани с интерферон-β (IFN-β) или IL-4 в продължение на 5 дни, а след това са култивирани с тумор некрозис фактор-α (TNF-α) в продължение на 2 дни, за да се получат дендритни клетки (DCs) с висока експресия на CD11c и CD83, които имат по-силна способност да насърчават пролиферацията на алогенни CD4+T клетки и CD8+T клетки. Многобройни полизахариди от естествени източници имат отлична имуномодулираща активност, като полизахариди от гъби шийтаке, гъби с разцепени хриле, гъби Юнжи и Poria cocos, които са приложени в клиничната практика. Те могат ефективно да подобрят имунната функция на организма, да засилят имунитета и да служат като адювантни терапии за противотуморно лечение. Въпреки това, има малко изследователски доклади за PFC като човешки имуномодулатор. Следователно, тази статия провежда предварителни изследвания върху ролята и свързаните с нея механизми на PFC за насърчаване на узряването на moDCs, за да се оцени потенциалът на PFC като естествен имуномодулатор.

Поради изключително ниския дял на дендритните клетки (ДК) в човешките тъкани и високата степен на междувидова консервация между миши и човешки ДК, за да се решат трудностите в изследването, причинени от ниското производство на ДК, са изследвани in vitro индукционни модели на ДК, получени от мононуклеарни клетки от човешка периферна кръв, които могат да получат ДК с добра имуногенност за кратък период от време. Следователно, в това проучване е използван традиционният метод за индуциране на човешки ДК in vitro: съвместно култивиране на rhGM CSF и rhIL-4 in vitro, смяна на средата през ден и получаване на незрели ДК на 5-ия ден; на 6-ия ден са добавени равни обеми PBS, PFC и LPS според групирането и са култивирани в продължение на 24 часа, като протокол за култивиране за индуциране на ДК, получени от мононуклеарни клетки от човешка периферна кръв.

Полизахаридите, получени от природни продукти, имат предимствата на ниска токсичност и ниска цена като имуностимуланти. След предварителни експерименти, нашата изследователска група установи, че PFC значително усилва зрелия маркер CD83 върху повърхността на дендритни клетки (DC) от човешки периферни мононуклеарни клетки, получени от тяхна периферна кръв, индуцирани in vitro. Резултатите от флоуцитометрията показаха, че интервенцията на PFC в концентрация от 10 μg/mL за 24 часа води до пикова експресия на зрелия маркер CD83 върху повърхността на дендритните клетки (DC), което показва, че DC са навлезли в зряло състояние. Следователно, нашата изследователска група определи плана за индукция и интервенция in vitro. CD83 е важен зрял биомаркер на повърхността на DC, докато CD86 служи като важна костимулираща молекула на повърхността на DC, действайки като втори сигнал за активиране на Т-клетките. Повишената експресия на два биомаркера CD83 и CD86 показва, че PFC насърчава узряването на дендритните клетки (DC) от човешки периферни мононуклеарни клетки, което предполага, че PFC може едновременно да увеличи нивото на секреция на цитокини върху повърхността на DC. Следователно, това проучване оценява нивата на цитокините IL-6, TNF-a и IL-10, секретирани от дендритните клетки (ДК), използвайки ELISA. IL-10 е тясно свързан с имунната толерантност на ДК, а ДК с имунна толерантност се използват често при лечение на тумори, предоставяйки потенциални терапевтични идеи за имунна толерантност при трансплантация на органи; Семейството 1L-6 играе важна роля във вродения и адаптивния имунитет, хематопоезата и противовъзпалителните ефекти; Има проучвания, показващи, че IL-6 и TGF β участват съвместно в диференциацията на Th17 клетки; Когато тялото е нападнато от вирус, TNF-a, произвеждан от ДК в отговор на вирусното активиране, действа като автокринен фактор за зреене, за да насърчи зреенето на ДК. Блокирането на TNF-a ще постави ДК в незрял стадий, предотвратявайки пълноценното им упражняване на функцията за представяне на антиген. Данните от ELISA в това проучване показват, че нивото на секреция на IL-10 в групата с префлуенца (PFC) е значително повишено в сравнение с другите две групи, което показва, че PFC повишава имунната толерантност на ДК; Нарастващите нива на секреция на IL-6 и TNF-α предполагат, че PFC може да има ефект на засилване на DC за насърчаване на диференциацията на Т-клетките.